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枣果微生物生态与枣缩果病研究

薛晓妮  
【摘要】:近年来随着枣树种植面积的扩大,病虫害对枣树的危害日益严重,其中枣缩果病发生与防治日益成为红枣生产环节中迫切需要解决的问题。该病常在枣果成熟期爆发,严重影响了枣果品质,降低商品价值,甚至会造成毁灭性灾害。因此,对枣缩果病病原及其品种抗性的研究显得十分重要。 以七月鲜、骏枣、梨枣和木枣为主要材料,对缩果病病原菌进行了分离、纯化、培养、致病性测定及形态学与分子生物学鉴定;从枣果微生物生态的角度探究影响缩果病的微观因素;并对病、健枣果不同部位果肉组织的酶活性进行了分析。取得了如下结果: 1.枣树不同品种缩果病田间自然发病率调查结果表明:同一枣园缩果病呈逐年加重趋势;在调查的8个品种中,以木枣发病最轻,七月鲜发病最重,其余品种轻重依次排序为晋枣、蜂蜜罐、赞皇大枣、狗头枣、梨枣、骏枣。 2.采用常规组织分离法对病原菌进行分离、培养、筛选、纯化并回接进行致病性鉴定,得到三种真菌和一种细菌,即菌株F1、F3、F4和B2,经单菌或混合接种,可引起与田间相同的典型缩果病症状,且符合柯赫氏法则。表明F1、F3、F4和B2为枣缩果病病原菌。结合形态学与分子生物学方法进行鉴定,F1鉴定为链格孢属(Alternaria C.G. Nees), F3鉴定为茎点霉属(Phoma glomerata),F4鉴定为盾壳霉属(Coniothyrium olivacean Bon),B2鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus.amyloliquefaciens)。 3.从病果中分离到969株内生菌,其中真菌492株,细菌418株,放线菌28株。采用形态学与16S-ITS-PCR扩增相结合的方法鉴定出20个真菌属,优势属为链格孢属(Alternaria)、茎点霉属fPhoma)和镰刀菌属(Fusarium);采用16SrDNA对细菌进行分子水平上的鉴定,通过对比结果可确定10个细菌属,其中芽孢杆菌(Bacillus)为优势菌。即病原菌大多为枣果优势内生菌,初步确定枣缩果病病原可能具有长期潜伏性,为研究枣缩果病的侵染规律提供了依据。 4.对枣果不同部位(内、中、外)的微生物区系研究表明,在枣果靠近皮层组织分离的真菌数量最多,在枣核与果皮之间的果肉部位真菌数量最少,靠近枣核部位分离的数量居中。细菌、放线菌数在枣果内的分布情况相同。 5.对不同抗性品种的病、健枣果不同部位均进行了超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性及丙二醛(MDA)含量测定,结果表明:SOD活性和MDA含量与枣品种的抗病性呈负相关,POD活性与枣品种的抗病性呈正相关,PAL、CAT活性均有所升高,其中PAL的升高幅度与枣果抗病性呈正相关;同一品种病、健果不同部位的四种生理酶活性及MDA含量均有显著差异,七月鲜中,健果外部酶活及MDA含量最高,中部与内部接近或稍高于内部,而在病果中,酶活性及MDA含量在外部最高,其次为内部,中部最低。


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