君迁子遗传多样性及结实类型的研究

【摘要】：本文在物候期观测的基础上，对24份君迁子（Diospyros lotus L.）种质资源进行形态学观测，采用组间联接方式进行聚类分析；采用SCoT分子标记技术，对46份君迁子种质资源的亲缘关系和遗传多样性进行了聚类分析；选取了2份君迁子母株及其各自45株实生后代采用套袋技术和SCoT分子标记技术，探讨了君迁子的兼性无融合生殖现象；利用流式细胞仪确定了部分君迁子种质资源的染色体倍性。 主要研究结果如下： 1.对西北农林科技大学国家柿种质资源圃保存的24份君迁子的21个形态学性状进行观测分析，采用组间联接进行聚类分析，用PASW statistics18.0软件聚类并形成树状图。平均Euclidean距离为10时，可以把24份君迁子种质资源分成五大类群：圆形有核果、圆形无核果、长圆有核果、长圆无核果和扁圆有核果，第Ⅰ类群包括两个亚群，共8个材料，第Ⅱ类包括3个材料，第Ⅲ类包括10个材料，第Ⅳ类包括2个材料，第Ⅴ类只包括一个材料。不同性状在不同材料间表现出不同程度的多样性，变异系数最大的是果面斑，达到169.40%，其次为核形状（66.26%），萼片大小的变异系数最小（13.67%）；16个质量性状中核饱满度的多样性信息指数最高（1.908），果顶形状的多样性信息指数最低（0.547）；5个数量性状中，单果核数量的多样性信息指数最高（0.687），顶端1-2芽间距离平均值（mm）的多样性信息指数最低（0.438）。 2.建立SCoT-PCR的最优反应体系：20μL优化体系的最优组合为：40ng/μL模板DNA2.0μL，25mmol/LMg2+2.0μL，2.5mmol/L dNTPs1.6μL，10μmol/L引物1.0μL，5U/μL Taq聚合酶0.2μL。 3.根据46个品种(系)的相似系数计算遗传距离进行聚类分析，并绘制树状图。以遗传距离0.53为阀值，聚类分析可将46份君迁子材料划为6类，并分析了不同品种(系)及类群间的亲缘关系。 4.通过套袋技术和分子标记技术确立了君迁子兼性无融合生殖的遗传特性，为君迁子种质资源的育种及无融合生殖遗传调控机制奠定了基础。 5.通过流式细胞分析仪检测君迁子植株叶片DNA相对含量，结果表明红花野毛柿为四倍体植株，沙红无核为二倍体植株，浙江柿为二倍体植株，乌柿为六倍体植株，壁山牛心柿为四倍体植株。