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三七根腐病病原菌分离鉴定及防治药剂筛选

汪静  
【摘要】:近年来,伴随着三七的产业化和规模化生产,三七根腐病的发病率也在逐年升高,已逐渐成为限制三七产业发展的主要原因之一。本试验选取云南文山三七科技研究园的根腐病三七病根及其根际的土壤,分离出致病真菌并鉴定,对病原真菌生长的生物学特性展开研究,并以室内杀菌剂的筛选为基础,进行了大田杀菌剂的筛选。 从云南文山三七种植种植基地采集三七根腐病病根及其根际土壤,共分离获得90个菌落。依据菌落形态和菌株形态及科赫法则初步鉴定可以分为6类:茄孢镰孢菌(Fusarium solani)、链格孢菌(Alternaria alternaria)、尖镰孢菌(Fusarium oxysporum)及青霉菌属(Penicillium)、曲霉菌属(Aspergillus.)、木霉菌属(Trichoderma spp.)的一些腐生菌。分离频率分别为26.67%、24.44%、20.00%、12.2%、8.89%和7.78%。为确定致病菌分类地位,对本文中的ISO32、ISO33、ISO34菌株进行18s rDNA序列分析。 对两种致病菌进行生物学特性分析。温度对菌落的生长影响明显,对菌丝的生长影响很大。尖镰孢菌在15~35℃均能生长,25℃左右菌丝的生长速度显著快于其他温度。当温度高于40℃时,菌丝不能生长。茄病镰刀菌在15~35℃均能生长,30℃左右较其他温度菌丝生长迅速,当温度高于40℃时,菌丝不在生长。链格孢菌在15~40℃均能生长,且随着温度升高,长势越来越快,40℃下5d菌落直径可达45.33mm。 尖孢镰刀菌在pH值4.0~9.0均可生长,pH值7.0时为尖孢镰刀菌的最适pH,菌丝生长速度最快,5d时菌落直径可达到58mm, pH值变化对茄病镰刀菌和链格孢菌的生长影响差异不大。比较了9种碳源对致病真菌菌丝生长的影响。其中麦芽糖、甘露糖、果糖对尖镰孢菌菌丝的生长有明显的促进作用,碳源对茄病镰刀菌和链格孢菌菌丝的生长促进作用不明比较6种氮源对致病真菌菌丝生长的影响。其中蛋白胨对尖镰孢菌和茄病镰刀菌菌丝生长的促进作用明显,蛋白胨、酪素对链格孢菌菌丝的生长促进作用明显,尿素对三者的菌丝生长有明显的抑制作用 K、P、Zn、Cu四种矿质元素中,Zn、Cu元素浓度的改变对尖镰孢菌菌丝的生长速度有明显的影响,Zn元素浓度在0.027g/L左右时菌丝生长旺盛且菌丝浓密,如图3-8所示。茄孢镰孢菌对P、Zn元素浓度的改变较为敏感,当P元素浓度在0.15g/L左右培养5d,菌落直径可达到35.00mm,Zn元素浓度在0.024g/L左右时菌丝生长速度较快。如图3-9所示。K、Zn、Cu离子的浓度改变对链格孢菌的影响都很明显,当K元素浓度在1.5g/L左右,P元素浓度在0.12g/L左右, Cu元素在0.012g/L左右时,菌丝生长旺盛。 杀菌药剂的室内试验表明,70%甲基硫菌灵250倍、80%代森锰锌700倍、30%苯醚甲环唑3000倍、绿都菌剂1号500亿活菌1000倍、25%多菌灵250倍、根康600倍、10%多抗霉素B1000倍对尖镰孢菌的抑菌效果较好,对茄孢镰孢菌抑菌效果好的70%甲基硫菌灵250倍、25%多菌灵250倍、根康600倍、绿都菌剂1号500亿活菌1000倍、绿都菌剂1号100亿活菌600倍的5种药剂,70%甲基硫菌灵250倍、、80%代森锰锌700倍、50%腐霉利500倍、绿都菌剂1号500亿活菌1000倍、30%苯醚甲环唑3000倍对链格孢菌抑菌效果较好。 大田药剂防治试验表明,对茄孢镰孢菌引发的二年生三七根腐病防治效果较好的是根康600倍、70%甲基硫菌灵250倍、绿都菌剂1号500亿活菌1000倍,健康指数可达86.67%、73.33%、80%。绿都菌剂1号500亿活菌1000倍、根康600倍、25%多菌灵250倍、70%甲基硫菌灵250倍对尖镰孢菌引起的根腐病防治效果较好,70%甲基硫菌灵250倍、50%腐霉利500倍对链格孢菌引起的根腐病防治效果较好。


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