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叶菜中叶酸含量的HPLC测定条件优化及不同处理方式对叶酸保留效果研究

张毅  
【摘要】:叶酸是人体在利用糖分和氨基酸时的必要物质,是机体细胞生长和繁殖所必需的物质,它对人体的健康作用日益被人们所认识。本文以常见的叶菜类蔬菜菠菜、生菜、白菜等为试材,研究高相液相色谱法测定叶酸条件以及不同处理方式下叶酸含量,得出如下结论:1.试验中通过对液相条件流动相、流速、柱温、波长等条件的优化,确定了高效液相色谱法测定叶菜中叶酸以及五甲基四氢叶酸的检测方法。液相条件为:流速0.4ml/min;进样量20μL;检测波长285nm;柱温25℃;梯度洗脱条件:0min-5min6%乙腈+94%磷酸盐缓冲液;5min-25min由原始比例线性变化到25%乙腈+75%磷酸盐缓冲液,渐变得到该比例后维持2min,在27min-28min流动项比例线性变回原始的浓度比例。验证试验表明该方法具有灵敏度高,准确度好,线性范围宽(r0.9996)的特点。2.对叶酸的提取进行了单因素试验和正交试验。单因素主要研究提取温度、提取时间、料液比、提取次数对提取量的影响。由正交试验得出最佳的叶酸提取条件是:温度为90℃,提取时间为10min,料液比为1:5,提取次数为3次。该提取工艺比较简单,提取率达到97%。3.通过研究三种处理方式(清炒、水煮、鲜切)下八种蔬菜:菠菜、小白菜、大白菜、甘蓝、紫甘蓝、生菜、青菜、油麦菜中叶酸含量,得出叶菜在日常生活中最佳食用方式。保留率依次为:清炒(55.66±5.30)%、水煮(63.77±4.88)%、鲜切(83.275±2.45)%,变异系数分别为:7.65、9.52、2.94。由此可见鲜切较其他两种方式对叶酸保留效果更佳,鲜切作为新兴的即食蔬菜加工方式会成为一种新的时尚。在室温和4℃贮藏,后者叶酸保留效果较好。在贮藏前两天,4℃贮藏中叶酸降低慢,但是在两天之后降低较快,所以新鲜蔬菜买回来不食用时应该存放在4℃条件下才能更好吸收利用蔬菜中含有的叶酸,白菜除外,宜在两天内食用。


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