羊伪结核和大肠杆菌病病原分离鉴定及其二联灭活苗的研制

【摘要】：羊大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的一种以腹泻或急性败血症为特征的羊 传染病。主要感染数日至 6 月龄的羔羊。以高热、呼吸困难、神经症状、胸膜肺炎和 急性死亡为特征的羔羊败血型大肠杆菌病致死率最高,给养羊业带来巨大的经济损 失。从具有典型症状的不同羊场患病羊病料中分离到 20 株革兰氏阴性不溶血短杆菌, 结合生化试验结果和病理变化,确定病原菌为大肠杆菌。经血清型鉴定,发现 20 株 分离菌中有 18 株血清型为O78。分离菌对青霉素、氨苄青霉素耐受,对其它药物敏 感程度存在较大差异。致病性试验和回归试验证实,分离菌可致实验动物和羊发病死 亡。从致死动物病料中分离到了与自然病例相一致的大肠杆菌。 羊的另外一种由伪结核棒状杆菌引起的人畜共患慢性传染病—羊伪结核(羊干酪 性淋巴结炎)的发病率近年来在很多羊场呈逐年上升趋势。该病临床症状不明显,致 死率低,常被人们忽视。其主要特征是在患羊体表淋巴结或某些实质性脏器形成干酪 样脓肿,使患羊消瘦,生产性能低下或死胎,是国际公认的难以防治和彻底消除的传 染病之一。对可疑病羊病料进行病原菌分离鉴定,发现一种无荚膜、无芽孢的革兰氏 阳性多形性球杆菌,对青霉素和利福平等多种药物耐受,对实验动物有一定致病性和 致死性,可复制出与原始病例相一致的动物模型。结合生化试验特点和血清学试验结 果、临床症状等,判定其为伪结核棒状杆菌。 由于药物治疗不但易产生耐药菌株,而且需要大量人力、财力和物力,因此我们 尝试用分离的地方菌株制作联苗对羊的这两种传染病进行预防。以上述鉴定过的羊大 肠杆菌和伪结核棒状杆菌作为制苗菌种接种适宜培养基进行大量增殖,经甲醛灭活后 按一定比例加入佐剂,制成羊伪结核及大肠杆菌病多价二联油乳灭活苗,每毫升疫苗 含两种菌均在 100 亿左右。多项实验室检查证明,该二联苗稳定性好,使用安全,无 不良反应。实验动物免疫后 28 天,经攻毒试验及对血液中淋巴细胞比率和抗体的检 测,发现该疫苗免疫原性好,对实验动物的保护率为 100%。杨凌某羊场 200 多只羔 羊免疫接种该二联苗后,4 个月来未发现一例可疑病例,有效预防和抑制了羊大肠杆 菌病及伪结核病的发生和流行,效果可靠,可进一步推广应用。