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杜仲醇的提取分离及合成积累动态研究

彭金年  
【摘要】:将杜仲醇对照品配制成一定浓度的标准溶液系列,用高效液相色谱仪测定其含量,绘制标准曲线,确定了高效液相色谱法测定杜仲醇含量的色谱条件:色谱柱:ODS;流动相:甲醇∶水=10∶90;检测波长:210nm;流速:1mL/min。 采用单因素和正交试验的方法,对影响杜仲醇提取率的主要因素进行了分析,并用高效液相色谱仪测定了不同提取条件下杜仲醇的含量,确定了杜仲醇的最佳提取条件:原材料粉碎,加10倍量蒸馏水在80℃水浴回流提取2次,每次2h。 研究确定了杜仲醇的提取分离工艺:原料加10倍量蒸馏水在80℃水浴回流提取2次,每次2h。滤液合并、浓缩,以95%乙醇沉淀,醇液浓缩至一定浓度,反复上D-101大孔吸附树脂柱进行分离,水洗脱,TLC检测,CHCl3-MeOH-H2O(7:3:0.5) 展开,收集10%硫酸乙醇溶液显粉紫色的部分。富集一定量样品上硅胶柱分离,5%、10% CHCl3-MeOH溶液依次洗脱,收集10% CHCl3-MeOH洗脱部分,浓缩后得无色油状物,即杜仲醇。 采用不同杀青方法对杜仲鲜叶进行处理,粉碎,加10倍量蒸馏水在80℃水浴回流提取2次,每次2h,用高效液相色谱仪测定杜仲醇含量。结果表明:用烘箱在100℃烘30min后,自然阴干处理的杜仲叶中杜仲醇含量最高,为有效提取杜仲醇的最佳预处理方法。 对不同栽培模式、不同生长季节杜仲叶和杜仲皮中杜仲醇的含量进行测定,方差分析结果显示,不同栽培模式、不同生长季节杜仲叶和杜仲皮中杜仲醇含量均存在极显著差异。 其合成积累动态规律如下:乔林栽培模式下的杜仲叶,杜仲醇含量在7月中旬出现第一个高峰,9月中旬达到第二个高峰,且为全年最高值,8-10月间含量保持较高水平;叶林栽培模式下的杜仲叶,杜仲醇含量在5-6月比较稳定,且为全年最高值,9月中旬达到第二个高峰;乔林栽培模式下的杜仲当年生枝皮,杜仲醇的含量只在6月中旬有一个高峰,且在5-6月呈比较稳定的增长趋势;叶林栽培模式下杜仲皮杜仲醇的含量春季明显高于秋季(约6倍)。 对不同的栽培模式及药用部位而言,乔林叶中杜仲醇的含量较之叶林叶要高;而乔林皮中杜仲醇的含量较之叶林皮要低。


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