红王子锦带组培再生植株体系的研究

【摘要】：红王子锦带 (Weigela florida cv.‘Red-prince’)是我国近年来从美国引进的一个重要园林观赏树种，目前主要通过扦插、分株方法繁殖。国内外仅有少量关于红王子锦带组织培养研究的报道。本文以建立红王子锦带离体再生体系为目标，从无菌苗的建立、基本培养基的筛选、外源激素的配比及其浓度的筛选、生根培养及愈伤组织诱导分化等方面进行了较为系统深入的研究，具体结果如下： （1）外植体的最佳采取时间以3月下旬到5月上旬为宜，对室内和室外嫩枝表面消毒采用先0.1%HgCl2 4-6min，再5%NaClO 10min的间歇性消毒方法。 （2） 茎段起始和增殖培养选用高盐培养基MS好于中盐和低盐培养基B5、WPM和1/2MS培养基，其上增殖芽数较多，茎芽高生长明显。 （3）增殖培养中，单独添加 6-BA 2.5mg/l对茎芽的增殖有明显的促进作用，但是抑制了茎芽的伸长生长；同时添加6-BA 2.5mg/l和NAA0.05～0.1mg/l对促进茎芽增殖作用不显著，但明显的促进茎芽的伸长生长，且茎芽粗壮，生长势旺盛。 （4）培养基中单独添加GA31.0～2.0 mg/l对茎芽伸长生长有很明显的促进作用，但对芽的增殖无显著影响；GA3 0.5～1.0mg/l与6-BA配合使用时，对茎芽的增殖和伸长生长均有明显的促进作用，但当GA3浓度大于1.0mg/l时，生长势衰弱，节间拉长，茎秆纤细，气生根发达，80%的茎芽不能继续进行生根培养。 （5）最佳增殖培养基配方为：MS培养基中添加6-BA2.0 mg/l、NAA0.06mg/l 和GA30.6mg/l。平均增殖芽数可达5.1，茎芽长达1.9cm。 （6）从生根数、根长和生根率等因素综合考虑，以WPM附加NAA0.1mg/l、IBA0.05mg/l和蔗糖20g/l时生根效果较好，生根率达到90%以上。 （7）诱导愈伤组织时，室内叶片和茎段对愈伤组织诱导率的影响无显著差异；叶背面向上和茎段纵切面向上为较适合的接种方式；暗培养15d后再进行光培养可以提高愈伤组织诱导率和生长速度。 （8）在改良MS基本培养基中，生长素和细胞分裂素组合及浓度配比对愈伤组织诱导和增殖分化的影响有明显的差异。其中，NAA与6-BA组合诱导的愈伤组织质地紧密，颜色鲜绿色，NAA/6-BA浓度为0.5/1.0～2.0mg/l时，只有不定根发生；浓度为0.5/ 1.0～2.0mg/l，个别有单生不定芽分化。 （9）本试验中没有从愈伤组织诱导出丛生芽，但有大量不定根和气生根发生。通过细胞学观察，未发现内生芽器官，仅观察到不定根的痕迹。