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灰葡萄孢培养滤液的生物活性及其影响因素

彭文文  
【摘要】:灰葡萄孢(Botrytis cinerea)是一种寄主范围很广的植物病原菌,其代谢产物--真菌毒素对寄主植物的致毒活性[81]报道较多。近年来研究发现,许多植物病原菌分泌的毒素还有杀草、杀菌等活性[82-84],有些的活性物质已经开发成农药。灰葡萄孢代谢产物的种类很多[85],目前尚未见开发利用的报道。从开发利用真菌资源,创制环境和谐农药的目的出发,本研究选用灰葡萄孢BC4 真菌为目标,测定了其培养滤液的生物活性和对小麦、玉米、棉花的安全性;优化了其除草活性成分的培养条件,并研究了旋转浓缩过程对其除草活性成分的影响。 1.分别用生长素率法和抑菌圈法测定培养滤液对部分植物病原菌和细菌的抑菌活性, 用浸渍法测定其杀虫活性, 以杂草种子萌发和幼苗受阻为指标测定其除草活性。结果表明稀释3倍的灰葡萄孢培养滤液对小麦纹枯病菌、小麦根腐病菌和小麦赤霉病菌的抑制率分别为66.2% 、61.6% 、56.4%;对黄瓜角斑病菌、马铃薯环腐病菌和白菜软腐烂病菌的抑菌圈直径分别为1mm、6mm 、9mm;稀释20倍的培养滤液对杂草种子萌发有明显的抑制作用;在出苗3d后的供试植物叶面上喷施原液,24h对反枝苋和牵牛花等双子叶杂草幼苗毒杀活性达100%, 而对禾本科杂草的作物影响很小;培养滤液对黏虫、小菜蛾和菜青虫的杀伤活性很小。表明灰葡萄孢培养滤液中含有除草和抑菌活性成分。 2. 以培养滤液对种子幼根幼芽生长的抑制率为指标,测定培养滤液对小麦、玉米、棉花种子发芽的安全性;以叶面喷施后测定幼苗高度抑制率的方法,探讨培养滤液对作物幼苗生长的安全性;以收获时作物的株高、颗粒数、千粒重及穗重等为指标,测定培养滤液对小麦、玉米产量的影响。结果表明,稀释20倍的培养滤液对小麦和玉米种子萌发均有抑制作用,但对幼苗生长几乎无影响;将培养滤液浓缩12倍,在小麦和玉米一芯一叶期叶面喷施,收获前小麦和玉米的结穗大小和籽粒饱满程度与对照没有明显差异。表明灰葡萄孢培养滤液可以作为小麦和玉米的庙后除草剂开发利用。 3. 以灰葡萄孢培养滤液对反枝苋种子根芽生长的抑制率作为活性指标,测定了培养滤液的除草活性,探索了不同碳源和培养条件对培养滤液除草活性的影响。结果表明,蔗糖+葡萄糖(质量比3:2)是较好的碳源组成;光照条件和温度是灰葡萄孢培养滤液除草活性的主效因素,在25℃和避光条件下培养得到的培养滤液活性最高;在250mL 培养液中添加2g 乙酸钠可使培养滤液除草活性达到91.2%。 4. 用旋转浓缩法浓缩灰葡萄孢代谢产物的培养滤液,以试样对反枝苋种子发芽的校正抑制率为活性指标测定蒸出液和浓缩液的除草活性,同时测定蒸出液的紫外吸收曲线。结果发现,浓缩至原体积一半时的蒸出液和浓缩至干后的蒸出液均表现出生


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