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无核抗病葡萄胚挽救技术体系优化及新品系培育

潘学军  
【摘要】:无核葡萄是当今世界葡萄消费和育种的重要方向之一。无核葡萄的合子胚在发育过程中败育而不能发育成正常的种子,因而常规育种只能以无核品种作父本杂交选育无核葡萄品种,但后代中无核几率低(0~15.9%),育种效率低下。胚挽救技术可用于无核葡萄作母本的品种间杂交,后代无核性状比率高(45%~82%),育种效率高,但选育的欧洲葡萄无核品种的突出缺点是缺乏抗病性。国外已将该技术应用于无核葡萄与圆叶葡萄育种中,但又存在杂交障碍,成苗率极低的问题。中国葡萄属野生种抗病性强,与欧亚种无核品种杂交亲合性强。因此,利用胚挽救技术获得欧洲葡萄无核品种与中国葡萄属野生种杂交后代,以培育无核抗病葡萄新品种(系)是完全可行的。  本研究田间人工杂交38 个葡萄种间杂交组合和13 个种内杂交组合。在前期胚挽救初步研究的基础上,本试验用19 个以无核葡萄为母本的杂交组合为试材,进行了无核抗病葡萄胚挽救的进一步研究,主要取得了如下研究结果: 1. 通过田间杂交和胚挽救获得了51 个杂交组合的葡萄新种质2998 份。利用胚挽救技术获得19 个杂交组合幼苗814 株,其中13 个无核品种×中国葡萄属野生种(杂种)组合成苗257 株;常规田间杂交组合32 个,成苗2184 株,其中20 个中国葡萄属野生种(杂种)×无核品种组合成苗1606 株;   2. 获得了适宜无核抗病葡萄即将败育的幼胚继续发育的最佳培养基:MM3+10mmol/L 甘氨酸;建立了其最优培养方式:固液双层培养;筛选到了适宜作胚挽救母本的欧洲葡萄无核品种是爱莫无核(Olmo Seedless)、底来特(Delight)和火焰无核(Flame Seedless)。适宜培养基、培养方式和胚挽救母本的最佳搭配使无核抗病葡萄胚发育率高达66.67%,成苗率达64.58%。获得了一种适宜诱导合子胚胚状体再生的培养基配方:ER 固体+1.0umol/L BA。利用该培养基对底来特×北醇的合子胚诱导率达82.61%。   3. 建立了葡萄胚挽救苗移栽技术体系:春季选择壮苗→强光锻炼1 周→无菌条件


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