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皂刺抗宫颈癌活性及其作用机理的研究

龙玲  
【摘要】: 宫颈癌是一种严重危害妇女健康和生命的生殖系统恶性肿瘤,病因目前尚未完全明了,可能是社会经济因素、宫颈病变、病毒感染及免疫功能下降等综合作用的结果。由于发病机理多种多样,防治很难一蹴而就。目前治疗宫颈癌大多采用化学合成药物,在治疗过程中易产生毒副作用和多药耐药性。天然药物以其毒副作用低和不产生耐药性引起研究者的高度关注。因此筛选天然来源的抗宫颈癌药物成为药理学领域的研究热点。 皂刺在我国分布广泛,是中医治疗宫颈癌和乳腺癌等多种癌症的常用配伍药。目前对皂刺药理活性的研究还未广泛展开,皂刺及其有效成分的抗癌作用尚未见报道。 本研究利用小鼠宫颈癌U14细胞和人宫颈癌Hela细胞分别建立体内外实验模型,对皂刺抗宫颈癌活性及其作用机理进行了研究,结果如下: (1)用热回流法制备皂刺醇提物,研究其对小鼠移植性宫颈癌的影响。结果发现皂刺醇提物能明显抑制实体瘤小鼠肿瘤生长并延长腹水瘤小鼠的存活时间,低、中、高剂量组(250、500和1,000 mg/kg体重)抑瘤率和生命延长率分别为47.5%、59.5%、63.9%和52.2%、67.3%、78.8%。表明皂刺醇提物具有显著的抗小鼠移植性宫颈癌生长的作用。 (2)用植物化学成分分项预试法检查发现,皂刺中含有糖类、皂甙、黄酮、酚类化合物、蛋白质、多肽、有机酸、木质素、甾类化合物、三萜、挥发油和生物碱等成分,而无鞣质、香豆素、醌类和萜类内酯化合物。 (3)采用分步萃取法和聚酰胺柱层析法提取精制皂刺总黄酮,并用显色反应和比色法对其进行定性定量测定。结果表明皂刺总黄酮中主要含有黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮类、二氢黄酮醇类和异黄酮类化合物,总黄酮含量为1.2%。 (4)研究皂刺总黄酮对小鼠移植性宫颈癌的作用发现,总黄酮低、中、高剂量组(75、150、300 mg/kg体重)均可抑制小鼠实体型与腹水型宫颈癌的生长,抑瘤率和生命延长率分别为43.6%、50.3%、55.2%和47.9%、56.4%、62.4%。表明皂刺总黄酮也具有抑制小鼠移植性宫颈癌生长的作用。 (5)对实体瘤小鼠瘤块进行肉眼观察发现,皂刺总黄酮各剂量组小鼠肿瘤易于剥离,体积较小,紧实,血管不丰富。用高剂量组瘤块制备肿瘤病理切片镜检发现,皂刺总黄酮抑制了肿瘤细胞的生长,部分细胞呈现坏死表现如核固缩、碎裂和溶解。 (6)皂刺总黄酮高剂量组实体瘤小鼠肝、肾眼观色泽质地均正常,无病理学改变。病理切片镜检发现肝、肾细胞排列紧凑,结构清楚。表明皂刺总黄酮剂量达到300mg/kg体重时不会引起小鼠毒性反应。 (7)对实体瘤小鼠免疫器官胸腺和脾脏指数进行分析,并用放免法测定肿瘤坏死因子与白细胞介素-2的浓度。结果发现皂刺总黄酮各剂量组均可显著提高小鼠胸腺指数


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