收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

昆白小鼠卵母细胞激活与孤雌胚体外发育

何志全  
【摘要】: 昆白小鼠是我国自主繁殖的近交系小鼠,由于其遗传背景清楚、生殖周期短、环境适应能力强等优点,是国内良好的实验动物模型。本研究以昆白小鼠为研究对象,分离了子宫内膜上皮细胞,对卵母细胞的孤雌激活、孤雌胚胎的发育潜能进行了研究,探讨了影响孤雌激活和发育的几个因素,为孤雌胚胎干细胞的分离、建系提供一些基础。主要内容有以下几点: 1. 37℃下2.5 mg/mL胰蛋白酶+0.04%EDTA 30 min消化子宫内膜,结合刮取法,能获得活力高、数目多、细胞比较单一的子宫内膜上皮细胞,子宫内膜上皮细胞的活力随着细胞培养代数的增加而下降(噻唑蓝法检测)。 2. 7%乙醇刺激小鼠卵母细胞,激活5~7 min时其激活效果及孤雌胚发育较好,其桑囊胚发育率可达29.77%; 3. SrCl2激活小鼠卵母细胞时,6~10 mmol/L为最佳处理浓度,3~6 h为最佳激活时间,其桑囊胚发育率可达16.67%。 4.在复合激活中,7%乙醇激活5 min在联合2 mmol/L 6-DMAP +5μg/mLCB激活3 h效果最佳,其桑囊胚发育率高达35.77%。 5.添加15%FBS的CZB和mM16培养液均能较好地支持2-cell胚胎发育到囊胚(27.2%,26.3%)。同时,添加FBS的CZB和mM16组的囊胚发育率也均显著高于相应的 添加BSA组(p0.01)。6. 15%FBS的CZB和mM16培养液进行孤雌胚培养时,胚胎在mM16培养液中仅有7.45%突破2-cell阻滞。但在CZB培养液中有41.66%能发育通过2-cell期并有29.17%到达桑囊胚。 7.昆明小鼠MⅡ卵母细胞激活后在含15%FBS的CZB培养液中可较好地克服2-cell阻滞并形成桑囊胚。在培养48 h添加1.1 mg/mL葡萄糖对胚胎的继续发育有利。 8.颗粒细胞、输卵管上皮细胞和小鼠子宫内膜上皮细胞与小鼠孤雌胚胎共培养24 h,共培养组胚胎与对照组大部分都能进行分裂。而从2-cell期进入4~8-cell期,CZB与颗粒细胞共培养组的胚胎发育无差异,但输卵管、子宫内膜上皮细胞共培养的胚胎要稍好一些(49.12%,48.23%)。CZB培养的桑囊胚发育率(32.99%)略低于其它三个共培养组的胚胎发育率(36.84%,38.71%,38.82%)(p0.05)。因此,共培养细胞对孤雌胚的发育有一定的促进作用。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 陈林君;孤雌生殖的胚胎干细胞研究进展[J];中华男科学;2004年01期
2 陈悦洲;原玮;任永生;;子宫内膜上皮细胞与小鼠胚胎共培养对小鼠胚胎早期发育的影响[J];郧阳医学院学报;2006年06期
3 韩明铭;金一;;哺乳动物卵母细胞孤雌生殖的现状与展望[J];黑龙江动物繁殖;2008年02期
4 何志全;窦忠英;;不同化学激活剂对小鼠卵母细胞的激活效果[J];中国兽医科学;2006年12期
5 王延伟;王延华;李建远;;孤雌生殖和孤雌胚胎干细胞研究进展[J];国际生殖健康/计划生育杂志;2008年05期
6 李朝灿,宋瑞琳;水稻孤雌生殖子房离体培养长成植株[J];科学通报;1984年07期
7 董清山;;植物离体孤雌生殖研究进展[J];牡丹江师范学院学报(自然科学版);2006年01期
8 查尔斯·J·柯尔 ,宗愉 ,连城;孤雌生殖的价值[J];自然杂志;1979年04期
9 赵佐宇,谷明光;化学药剂诱导玉米孤雌生殖植株的细胞遗传学研究[J];遗传学报;1988年02期
10 方宗熙,戴继勋,陈登勤;裙带菜的孤雌生殖及其后代的遗传特性[J];遗传学报;1979年01期
11 朱盈廉;;未来的伊甸园里只有夏娃[J];大科技;1999年05期
12 刘亚栋;孙永泉;;核桃无融合生殖研究进展[J];山东商业职业技术学院学报;2010年05期
13 徐厚镕,陈震古,刘小刚,吴成仓;激光诱发家蚕孤雌生殖的研究——Ⅲ 单性一号及单性二号蚕性状表现[J];量子电子学报;1991年04期
14 张怀玉,张琍,沈泽淮,洪要文,张学翠;棉蝗孤雌生殖的观察[J];昆虫知识;1995年03期
15 李绍文;多倍体昆虫[J];昆虫知识;2002年02期
16 ;孤雌生殖来源的油菜自交系3529[J];大自然探索;1983年02期
17 李和平,孙蒙祥,蔡得田,王灶安;草地早熟禾无融合生殖现象的研究[J];武汉植物学研究;1991年01期
18 董洪平,孙耀中,吴学仁,秦素平;化学药剂诱导太谷核不育小麦孤雌生殖的研究[J];遗传;1992年04期
19 王秦,谭琦,魏德忠;黄翅菜叶蜂孤雌生殖习性的初步研究[J];昆虫知识;1987年01期
20 徐清华,兰旅涛,韦启鹏;哺乳动物孤雌生殖研究进展[J];江西农业学报;1997年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 曾俊义;魏云峰;汪泱;谢安;娄远蕾;张梅;应国秋;徐信群;;间接接触共培养下骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞及相关调控基因的时序表达[A];第一届全国中西医结合心血管病中青年医师论坛论文汇编[C];2008年
2 王少沛;李卓佳;曹煜成;陈素文;杨莺莺;;微绿球藻、隐藻、颤藻的种间竞争关系[A];2007年中国水产学会学术年会暨水产微生态调控技术论坛论文摘要汇编[C];2007年
3 宋明宝;于学军;朱光旭;;双层共培养模型中内皮细胞对平滑肌细胞增殖能力的影响[A];中华医学会第11次心血管病学术会议论文摘要集[C];2009年
4 王春婷;杨浩;鞠躬;;嗅神经鞘细胞对神经突起体外生长的作用[A];中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会论文摘要汇编[C];2005年
5 张岩;罗奋华;吴应积;;大鼠曲细精管生殖细胞共培养和精子发生过程的观察[A];第一届中华医学会生殖医学分会、中国动物学会生殖生物学分会联合年会论文汇编[C];2007年
6 郑学栋;徐国兴;;联合共培养系统诱导骨髓间充质干细胞分化为视网膜色素上皮细胞的研究[A];第十届全国中西医结合眼科学术会议暨第五届海峡眼科学术交流会论文汇编[C];2011年
7 杨璞;祝增荣;张勤;程家安;;稻水象甲孤雌生殖的研究[A];第二届全国生物入侵学术研讨会论文摘要集[C];2008年
8 赵明辉;金永勋;康锦丹;梁爽;高威威;刘希;尹熙俊;;丙戊酸处理促进了猪孤雌激活胚胎早期体外发育[A];中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集(上册)[C];2010年
9 张文昌;王秀爱;刘凤军;庄益芬;陈曦;谢旭东;洪志勇;陈梅芳;叶屹峰;余翠月;;猪成熟卵母细胞的孤雌激活及体外胚胎培养的研究[A];中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集(上册)[C];2010年
10 史建民;田秀芝;王梁;高超;张璐;周光斌;史文清;汪锋;朱士恩;曾申明;田见晖;张忠诚;刘国世;;外源褪黑激素对猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活胚胎体外发育的影响[A];中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集(上册)[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 武建中;用于分离昆明小鼠治疗性胚胎干细胞的囊胚生成途径相关问题研究[D];西南大学;2009年
2 顾劲扬;骨髓间充质干细胞与肝细胞共培养的实验研究[D];南京医科大学;2009年
3 周英晋;共培养诱导骨髓间充质干细胞向leydig细胞分化的研究[D];第二军医大学;2011年
4 常青;软骨细胞和骨髓间充质干细胞共培养构建组织工程软骨的最佳比例[D];南京医科大学;2011年
5 何勇;催产素诱导下3D共培养促进ESC定向分化为CM的研究[D];第四军医大学;2010年
6 李雪峰;牛卵母细胞孤雌激活与体细胞核移植[D];西北农林科技大学;2001年
7 鹿群;卵母细胞激活技术与胚胎干细胞分离、培养[D];山东大学;2005年
8 杨素芳;水牛卵母细胞孤雌激活与体细胞核移植的研究[D];广西大学;2002年
9 欧东波;iPS细胞诱导分化及组织工程心肌构建的研究[D];第四军医大学;2012年
10 李雪峰;转染LMP-1基因人脂肪间充质干细胞与退变髓核细胞体外双层细胞微球三维条件下共培养的实验研究[D];苏州大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 何志全;昆白小鼠卵母细胞激活与孤雌胚体外发育[D];西北农林科技大学;2006年
2 王勇胜;卵丘细胞对牛卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育的影响[D];西北农林科技大学;2004年
3 李晋;雪旺氏细胞共培养对成肌细胞基因表达谱的影响[D];南方医科大学;2009年
4 陈洁;三种海洋经济微藻的共培养效应及其对孤菌与黑暗胁迫的响应[D];暨南大学;2003年
5 陈洁;山羊瘤胃厌氧真菌与细菌互作的体外研究[D];南京农业大学;2004年
6 魏志文;多菌二步发酵法生产高蛋白饲料的研究[D];河北大学;2005年
7 朱强;SD大鼠肝细胞、Kupffer细胞分离与培养/共同培养的实验研究[D];昆明医学院;2005年
8 朱蕾蕾;神经干细胞对去血清诱导PC12细胞凋亡的作用[D];大连理工大学;2006年
9 杨君杰;小鼠睾丸支持细胞诱导小鼠胚胎干细胞向生殖细胞分化的实验研究[D];第二军医大学;2006年
10 卢霞;体外诱导小鼠胚胎干细胞分化为造血干细胞[D];浙江大学;2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 冯蕾;近三年培养新技师60多万人[N];光明日报;2007年
2 记者 韩有存;临洮切实加强乡土人才队伍建设[N];定西日报;2008年
3 熊杰;马尔康扎实推进村级后备干部队伍建设[N];阿坝日报;2008年
4 孙文振;民族地区干部挂职锻炼工作成效显著[N];中国民族报;2007年
5 通讯员 曾广斌;抓党建促发展 求和谐[N];安康日报;2006年
6 曹建亭 张乐涛;投喂轮虫慎防带入病菌[N];中国渔业报;2006年
7 张中桥;西京医院建立人视网膜色素上皮细胞老化模型[N];中国医药报;2006年
8 记者 杨朝东 春光;内民大蒙医药学院30年共培养出3000余名蒙医药合格人才[N];通辽日报;2008年
9 刘燕燕;人才是七院发展之本[N];中国船舶报;2001年
10 实习记者 王姝;市青联:凝聚各界青年力量 开发青年人才资源[N];广元日报;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978