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金银花、丹参花的GC和HPLC指纹图谱构建

梁倩  
【摘要】: 色谱指纹图谱能全面地反映中药的整体化学特征,体现其内在的整体质量,可以弥补过去只对少数成分控制质量的弊端,是一种更为合理的质量控制模式,其独特的优势已得到了越来越多的认可。目前指纹图谱已成为国际公认的控制中药或天然药物质量的最有效的手段。这对药用植物的鉴定、GAP(中药材生产质量管理规范)基地的建设、选择优良种质资源、评价药材的道地性以及质量控制等方面极为有用。本研究拟利用高效液相色谱(High performance liquid chromatography简称HPLC)、气相色谱(Gas chromatography简称GC)以及GC-MS分析技术,结合多指标成分定量分析的方法,对金银花和丹参花挥发油、提取物进行综合分析,建立金银花和丹参花的指纹图谱。相关结果如下: 1.金银花挥发油GC指纹图谱的建立 采用GC法对10个不同产地的金银花挥发油进行分析,建立了GC指纹图谱。采用毛细管气相色谱法,氢火焰离子检测器进行检测分析,并对不同产地金银花药材进行了相似度比较。药材各成分得到了很好的分离,确定26个共有指纹峰。金银花挥发油GC指纹图谱可以作为鉴别金银花药材的检测标准之一。 2.丹参花挥发油GC指纹图谱的建立 为了综合利用丹参资源,以丹参紫花和白花为研究对象,对7个丹参花样品的挥发油成分进行了研究。建立了挥发油GC指纹图谱,并利用GC-MS分析了每个产地的丹参花挥发油化学组分,共鉴定出82种化合物,主要由倍半萜、脂肪酸、烷烃构成。倍半萜中含有β-石竹烯、β-石竹烯氧化物、α-石竹烯、杜松二烯。脂肪酸中含有十六烷酸(棕榈酸)。其中丹参花挥发油中β-石竹烯的含量最高,相对含量达12.2-31.7%。 3.金银花HPLC指纹图谱的建立 建立了11个不同产地的金银花药材甲醇提取物的HPLC指纹图谱,用甲醇-磷酸水溶液进行线性梯度洗脱,检测波长240nm,确定了16个共有峰。并测定了不同产地金银花中绿原酸和木犀草苷的含量,含量分别为1.46-3.71%,0.55-2.04%。绿原酸和木犀草苷含量均达到药典规定的标准。使用中国药典委员会推荐“计算机辅助相似度评价软件”进行数据处理,对不同产地金银花药材指纹图谱的相似度进行了数据比较分析,并将11个产地的金银花药材进行了聚类分析。HPLC指纹图谱具有良好的重现性,建立的指纹图谱可用于金银花药材的质量控制。 4.丹参花HPLC指纹图谱的建立 丹参中含有脂溶性成分和水溶性成分,本试验用70%的甲醇一次提取丹参花中的有效成分,结果表明,70%的甲醇既提取了丹参花中的水溶性成分,又提取了脂溶性的成分。用10个产地的丹参花建立其指纹图谱,并用丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、丹酚酸B,丹参酮Ⅰ、二氢丹参酮Ⅰ,丹参酮ⅡA共7个标品测定了丹参花中这些有效成分,结果表明丹参花中含除丹参酮ⅡA以外的其它6种成分。初步结果表明它有可能作为强心丹参滴丸的原料。另外对根、须根、茎、叶、花中有效成分进行比较,发现须根中的丹酚酸B和丹参酮ⅡA的含量明显高于其它部位。


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