收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

荧光法测定小檗碱的新方法研究

胡莎  
【摘要】:小檗碱(Berberine, BR),亦称黄连素,是一种重要的异喹啉生物碱。它是一种平面结构的药物,具有潜在抗癌功效,对其进行简单、灵敏的测定具有重要的临床医学意义。小檗碱的水溶液几乎不具有荧光,所以不能用常规荧光法直接测定小檗碱。本研究表明可以通过改善小檗碱的介质微环境,增强小檗碱的荧光,从而建立了测定小檗碱的荧光分析新方法,具体工作如下: 一、以离子液体[Bmim][BF4]为微介质荧光法测定小檗碱 离子液体(Ionic Liquid, IL)是指在室温或接近室温下呈现液态,完全由阴、阳离子所组成的低温熔融盐。与传统有机溶剂相比,离子液体具有不挥发、不可燃、导电性强、粘度很大、熔点低,溶解性好等优点。本研究发现将一定浓度的离子液体[Bmim][BF4]加入到小檗碱溶液时,小檗碱的荧光显著增强。据此现象,建立了一种简单测定小檗碱的新分析方法。详细考察了实验条件对此体系荧光强度的影响。在优化的实验条件下,小檗碱的浓度在1.0×10-6-1.0×10-4g/mL范围内与体系的荧光强度呈良好的线性关系(相关系数是0.9924,n=12)。本法检出限为0.13μg/mL。将此方法用于实际样品复方黄连素片中的小檗碱含量进行检测,结果令人满意。 二、以G-四聚体DNA为微介质荧光法测定小檗碱 G-四聚体DNA是指富含鸟嘌呤(G)的单链DNA在某些配体的诱导下通过G碱基间Hoogsteen氢键形成G-四链体,G-四链体进一步通过非共价的π-π堆积结合成的DNA分子的二级结构。本研究表明在钾离子存在下,小檗碱可以诱导富G单链DNA (G-rich DNA,5'-GGTTGGTGTGGTTGG-3')形成G-四聚体结构,此小檗碱-G-四聚体复合体具有很强的荧光。据此现象,建立了一种简单测定小檗碱的新分析方法。通过紫外-可见光谱、荧光光谱、圆二色光谱等手段,研究此体系荧光机理。在优化的实验条件下,小檗碱的浓度在1.0×10-8-1.0×10-5g/mL范围内与体系的荧光强度呈良好的线性关系(相关系数是0.9950,n=14)。本法检出限为1.2ng/mL。本法具有操作简单、灵敏度高、选择性高、线性范围宽等优点。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 杨忠瑾;;血红蛋白溶液——从四聚体到多聚体[J];国际骨科学杂志;1984年04期
2 赵修竹;;人补体第一成份中C1r A链的全部氨基酸顺序[J];国外医学(卫生经济分册);1988年03期
3 龚卫娟;可溶性MHCⅡ类分子四聚体的制备及其应用[J];国外医学.免疫学分册;2005年03期
4 钱春艳,季育华;MHC-Ⅰ~(pep)四聚体技术检测人类巨细胞病毒特异性细胞免疫功能的新进展[J];检验医学;2005年05期
5 刘霞;;MHC-肽四聚体的研究进展[J];国际免疫学杂志;2005年06期
6 刘海英;张建;邓安梅;耿红莲;周琳;朱烨;徐德兴;仲人前;;四聚体技术检测原发性胆汁性肝硬化患者血循环中抗原特异性T细胞[J];细胞与分子免疫学杂志;2006年01期
7 卢小玲;吴雄文;翁秀芳;李青;梁智辉;龚非力;;可溶性HLA-A*2402-pBRLF1复合物的体外折叠与四聚体化[J];华中科技大学学报(医学版);2006年02期
8 李丰耀;查庆兵;徐丽慧;迟晓云;贾仟涛;何贤辉;曾耀英;;负载HCMV pp65抗原肽的HLA-A*1101-GPI四聚体的制备和鉴定[J];现代免疫学;2006年06期
9 王栋;武国军;王禾;吴卫真;杨顺良;谭建明;;抗PSA/抗CD3两种双特异性单链抗体的活性研究[J];中华男科学杂志;2007年01期
10 王栋;王禾;武国军;吴卫真;杨顺良;林文洪;谭建明;;双特异性单链抗体介导的T细胞对前列腺癌细胞的杀伤作用[J];免疫学杂志;2007年02期
11 管洁;周育森;;禽流感病毒M2蛋白研究进展[J];微生物学免疫学进展;2007年02期
12 刘海英;张建;邓安梅;石玉玲;徐德兴;仲人前;;原发性胆汁性肝硬化HLA-A* 0201限制性PDC-E2特异性CTL功能分析[J];中国免疫学杂志;2007年06期
13 王笑迎;欧阳东云;何贤辉;徐丽慧;施焕敬;高琦;郭贺;;负载SIV抗原肽的中国恒河猴Mamu-B~* 1703可溶性单体及其四聚体的制备和鉴定[J];暨南大学学报(自然科学与医学版);2009年04期
14 王笑迎;查庆兵;何贤辉;欧阳东云;徐丽慧;郭贺;高琦;;负载野生型p53抗原肽HLA-A~*2402四聚体的制备和鉴定[J];暨南大学学报(自然科学与医学版);2010年02期
15 易绍琼,高杰英;四聚体技术的新进展[J];现代免疫学;2003年04期
16 娄加陶,仲人前;四聚体技术在自身免疫性疾病中的运用[J];生命的化学;2004年06期
17 乔苗;一种新的CTLs检测方法—可溶性MHC肽四聚体方法[J];国外医学.免疫学分册;2001年02期
18 何贤辉,徐丽慧,刘毅,蔡小嫦,曾耀英;加载HCMV抗原肽的HLA-A*0201单体及其四聚体制备和鉴定[J];生物工程学报;2004年03期
19 王晓花;可溶性MHC-肽四聚复合物法及其进展[J];中华微生物学和免疫学杂志;2005年01期
20 郝友华;杨新星;丁红晖;宋娜;朱帆;喻植群;杨东亮;;HBc-HLA-A~* 1101-β_2m复合物单体及其四聚体的制备和鉴定[J];中国免疫学杂志;2007年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 房国祥;虞伟;李晓军;武建国;;应用四聚体流式细胞术研究RA患者CCP抗原自身反应性T细胞[A];全国临床免疫检验研讨会暨第六届全国临床免疫学术会议论文汇编[C];2009年
2 钱亚云;王丽珩;张伟;龚卫娟;季明春;;加载bcr-abl抗原肽的HLA-A*0201四聚体的制备和初步应用[A];第11次中国实验血液学会议论文汇编[C];2007年
3 李艳萍;徐惠绵;吕大鹏;高宏;;四聚体技术评估鼠恶性黑色素瘤B16F10特异细胞免疫的实验研究[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集[C];2006年
4 吴战宏;李子博;陈小元;李方;;~(18)F标记的RGD肽四聚体(~(18)F-FPRGD4)的制备和microPET显像[A];首届全国肿瘤核医学新技术研讨会论文集[C];2007年
5 孙伟;唐婕;吴雄文;李佳楠;陆盛军;陈雪玲;翁秀芳;梁智辉;;原位四聚体染色法检测冰冻切片中的抗原特异性CTLs[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
6 谢丹;杜玄静;方毅敏;李研;张建波;高鸣;张扣兴;赖小敏;;应用CD4~+Vα9-J27/Vβ29-D1-J2和Vα9-J27/Vβ29-D2-J2 TCR四聚体诊断结核病的初步研究[A];中华医学会结核病学分会2011年学术会议论文汇编[C];2011年
7 黄利荣;李研;方毅敏;任亮亮;朱艳;唐文正;赖小敏;;E7多肽/HLA-DRB1*0404与E7多肽/HLA-DRB1*1602四聚体对肺结核患者外周血多肽特异性CD4~+T细胞治疗前后的变化的监测[A];中华医学会结核病学分会2011年学术会议论文汇编[C];2011年
8 张慧娟;王雪飞;王鹏;艾希成;张建平;汪力;;阳离子卟啉与端粒DNAG四聚体的相互作用[A];第六届全国光生物学学术研讨会论文集[C];2004年
9 刘海英;张建;邓安梅;耿红莲;周琳;朱烨;徐德兴;仲人前;孔宪涛;;四聚体技术检测原发性胆汁性肝硬化患者血循环中抗原特异性T细胞[A];第十届全军检验医学学术会议论文汇编[C];2005年
10 周吉军;王洪;王宇明;;MHC聚体技术在慢性乙型肝炎诊治中的应用[A];中华医学会全国第九次感染病学学术会议论文汇编[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 朴文花;MHC-肽四聚体的构建及临床初步应用[D];延边大学;2004年
2 刘海英;原发性胆汁性肝硬化患者中抗原特异性T细胞的研究[D];第二军医大学;2005年
3 李卡;肝细胞癌相关分子的基础和应用研究[D];第二军医大学;2007年
4 张彩娥;1.HLA-A2/HPV6E7四聚体的构建和应用 2.FPH致病基因定位于19p13.1-19pter[D];华中科技大学;2007年
5 孟晓静;新型抗体HLA-肽多聚体的制备及其对特异性CTLs的检测和诱导的研究[D];中国人民解放军第一军医大学;2003年
6 邵文雨;乙肝阳性肝移植病人外周血中HBV特异性CTL频度和急性排斥发生关系研究[D];第二军医大学;2007年
7 卢小玲;利用aAPC制备pMHC特异性T细胞及其在同种T细胞识别和抗肿瘤实验研究中的应用[D];华中科技大学;2007年
8 张静波;慢性持续性乙肝病毒感染表位特异性CTL的功能研究[D];第三军医大学;2004年
9 王黎芳;重组细胞生长因子结构与功能关系的研究[D];中国协和医科大学;2006年
10 黄开胜;山葡萄根和海南买麻藤藤茎中抗炎低聚茋类化合物的研究及活性低聚茋的仿生合成[D];中国协和医科大学;2000年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 付丽辉;G-四聚体小分子配体筛选的荧光新方法[D];陕西师范大学;2011年
2 杨桂兰;金粟兰AP1CHL基因功能的研究[D];首都师范大学;2004年
3 修雪亮;CD1d四聚体检测技术的初步改良[D];中国医科大学;2010年
4 周成城;应用二硫键捕获型单链三聚体技术制备PR1-HLA-A*0201四聚体[D];扬州大学;2013年
5 郭薇;HLA四聚体复合物检测系统的构建及初步鉴定[D];东南大学;2004年
6 赵艳霞;新型PR1-HLA-A~*0201-SCT四聚体的制备及初步鉴定[D];扬州大学;2010年
7 谢丹;CD4~+αβTCR四聚体和C5/HLA-DR四聚体的制备及应用[D];中山大学;2012年
8 褚福亮;应用HIV-1特异性表位多肽HLA-Ⅰ类分子四聚体分析HIV-1感染者体内特异性CTLs的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
9 贾仟涛;负载HCMV pp65_(341-349)抗原肽的HLA-A*2402四聚体的制备及其应用[D];暨南大学;2007年
10 宋娜;sH-2K~d-HBc复合物四聚体的构建与其初步的检测应用[D];华中科技大学;2006年
中国重要报纸全文数据库 前6条
1 吴通义;关于权利要求是否获支持的判断[N];中国知识产权报;2011年
2 王歈;肿瘤疫苗研究的新选择[N];中国医药报;2004年
3 董耀平 杨虹;原花青素何时夺“魁”[N];医药经济报;2004年
4 记者 白毅;肿瘤抗原NY-ESO-1b多肽疫苗完成临床前研究[N];中国医药报;2006年
5 宝建;杜仲有效成份多[N];上海中医药报;2007年
6 特约记者 虞仲义;高端橡胶防老剂TMQ实现国产[N];中国化工报;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978