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双酚A对中国林蛙(Rana chensinensis)的毒性和性腺分化的雌激素效应

吴虓飞  
【摘要】:随着工业的快速发展,酚类对环境污染的日益加重,双酚A(BPA)是一种化工原料的降解产物,对动物生存环境已形成污染。在高浓度下具有毒性效应,可直接导致动物中毒死亡;在低浓度对动物的内分泌机能具有干扰作用,导致动物生长发育和生殖机能异常,从而影响种群的正常繁衍。本研究以中国林蛙(Rana chensinensis)蝌蚪为研究对象,评价BPA对蝌蚪的毒性、抗变态和性腺分化的雌激素效应,探讨酚类环境雌激素的效应机制,并为环境保护提供理论依据。 实验将蝌蚪分为成体染毒组和野生组,分别暴露不同BPA浓度的水体中,变态完成后统计成活率、体长和体重、变态时间和雌雄比例,评价BPA对蝌蚪生长发育的毒性效应和对性腺分化的雌激素效应。用免疫组化方法检测ER、AR和芳香化酶在性腺中的表达及ER在肝中的表达。主要结果如下: 1 BPA对中国林蛙蝌蚪24h、48h、72h的LD_(50)分别为3.17×10~(-5)M、2.993×10~(-5)M、2.854×10~(-5)M,SD为0.8009×10~(-5)M。可见BPA在安全浓度以上,随着浓度的增加,蝌蚪的死亡率也增加。 2 在安全浓度以下,BPA在10~(-5)、10~(-6)、10~(-7)M下对林蛙蝌蚪的变态成活率没有影响。在成体染毒组,BPA在10~(-5)M下导致幼蛙体长减小。在野生组,各个BPA处理浓度对幼蛙体长没有影响。说明成体林蛙被BPA侵染后,其后代幼蛙的体长可受某一浓度BPA的影响而减小。 BPA在10~(-5)M下,可导致成体染毒组和野生组蝌蚪变态后幼蛙的体重都明显减小,而在其它BPA处理浓度下,对成体染毒组和野生组幼蛙的体重都没有明显影响,说明BPA导致幼蛙体重减小仅在某一浓度范围。 3 10~(-5)~10~(-6)M BPA可延长蝌蚪的变态时间,随着BPA浓度的增大,变态时间明显延长。BPA对成体染毒组和野生组蝌蚪的抗变态作用无显著差异,说明BPA对蝌蚪的抗变态作用与其父母代是否被BPA侵染无关。 4 BPA在10~(-5)、10~(-6)M下,可诱导成体染毒组幼蛙雌性比例明显增加,在10~(-6)M下,BPA可诱导野生组幼蛙雌性比例明显增加。说明BPA诱导中国林蛙幼蛙雌性比例升高仅在某一浓度范围,高于或低于这一浓度范围都不能引起雌性比例明显升高。成体染毒组受BPA诱导而雌性比例升高所适应的浓度范围比野生组大。 5 BPA可诱导林蛙出现雌雄同体,雌雄同体的比例与BPA浓度的变化未呈现一定规律。雌雄同体均出现于成体染毒组,在野生组未出现。可见成体染毒与雌雄同体的形成关系密切。推测林蛙成体受BPA侵染后,BPA进入母体卵巢并蓄积于卵母细胞中,含有BPA的卵子受精后发育成蝌蚪,随后在性腺分化中产生效应。 6 通过免疫组织化学检测,10~(-6)M BPA对林蛙幼蛙精巢芳香化酶具有最大的


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