药用植物绞股蓝Gynostemma pentaphyllum （Thunb.）Makino的GAP相关技术研究

【摘要】：绞股蓝Gynostemma pentaphyllum(Thunb.)Makino为葫芦科Cucurbitaceae多年生草质藤本植物,民间用于强身益寿的历史源远流长。明代《救荒本草》曾予记载,“饥馑岁月绞股蓝可以充饥”。明代的《农政全书》、《本草纲目》,清代的《植物名实图考》,现代的《全国中草药汇编》、《中药大辞典》、《实用中药手册》、《中草药彩色图谱》等书籍,均有记载。民间作野菜和草药使用,具有消炎解毒、止咳祛痰等功能,主要用于治疗慢性气管炎、传染性肝炎等。近代药理实验表明,绞股蓝具有调节免疫和降低血脂的作用,具有广阔的市场应用前景。 由于绞股蓝长期以来依靠野生资源和少数药农零散种植,资源日趋减少,随着国内用药量和出口量的增加,加之国家颁布对野生资源的保护政策,积极开展绞股蓝规范化种植的研究已迫在眉睫。平利为绞股蓝的主产区之一,种植历史悠久,2001年被陕西省科技厅列为中药材规范化种植科技示范区,“绞股蓝生产质量管理规范化(GAP)研究”课题2002年已列为国家“十五”科技攻关项目及陕西省中药现代化重点项目,2004年5月通过课题专家组验收,2004年11月通过国家药监局现场认证验收。本文的主要工作就是该课题的部分研究内容。 本研究通过对陕西安康地区绞股蓝种质资源的调查,并就其生物学特性、组织培养进行研究,为绞股蓝的良种繁育和优良栽培类型的选育提供技术支持。用HPLC法测定了不同地区绞股蓝的有效成分含量,确定了平利地区绞股蓝的最适采收期,为绞股蓝的规范化种植提供了依据,实验的结果如下: 1、通过对安康地区绞股蓝资源的调查,将绞股蓝根、茎、叶的性状、繁育特性、生物量与皂甙含量相结合,确定了5个优良栽培类型,并对各类型进行了系统的描述。 2、对绞股蓝各栽培类型的叶表面结构进行扫描,并对叶表面气孔数目及毛状体形态进行了分类描述。 3、系统研究了以绞股蓝叶片、茎段为外植体的组织培养和再生技术,筛选出了愈伤组织、不定芽、芽的增殖和生根的较佳培养条件,建立了比较简单可行的绞股蓝及植株再生体系,并获得大量的试管苗。具体如下: 1) 用MS+2,4-D 1mg/L+6-BA 0.5mg/L的培养基诱导叶片、茎段愈伤组织,诱导率可达100%,用MS+6-BA 2mg/L+KT 2.0 mg/L+NAA 0.01mg/L的培养基