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安宫牛黄丸对大鼠创伤性脑损伤后海马DG区CalpainⅡ、Caspase3表达和空间学习记忆功能的影响

文斌  
【摘要】:目的:观察安宫牛黄丸(AngongNiuhuang Pill, AGNHP)干预对大鼠TBI模型海马DG区CalpainⅡ、Caspase3表达和神经细胞超微结构,以及对大鼠Morris水迷宫空间学习记忆的功能影响。 方法:Wistar大鼠随机分为假手术组、创伤组、AGNHP高、低剂量组,后3组各分为24h,3天,7天,14天组,共计13组。Feeny法造模后给予AGNNHP灌胃。时间点取脑,SP法免疫组化染色,分析海马DG区积分光密度值。透射电镜观察海马DG区神经细胞超微结构改变。14天组Morris水迷宫测试在收集脑标本前进行。 结果:1 caspase3、calpainⅡ积分光密度值:①创伤组calpainⅡ在第1天升高,第3、7天显著高于第14天,第7天开始降低,第14天仍高于假手术组(p=0.0030.05)。AGNHP高剂量组相对于低剂量组在第1、3、14天显著抑制calpainⅡ的表达(p=0.041、p=0.08、p=0.005均小于0.05)。第14天时高于假手术组(p0.05)。AGNHP低剂量组相对于创伤组在第3、7、显著抑制calpainⅡ的表达(p=0.020.05、p=0.03)。14天时仍高于假手术组(p=0040.05)。②创伤组caspase3在第1、3天时高于第7、14天组(p0.05)。AGNHP高剂量组相对于低剂量组在第1、3,14天显著抑制caspase3的表达(p0.05),第14天仍高于假手术组(p=0.040.05)。AGNHP低剂量组对于创伤组在第3天显著抑制caspase3表达(p0.05),第14天高于假手术组(p0.05)。2 Morris水迷宫测试:①定位航行试验:AGNHP高剂量组比低剂量组和创伤组在用时和总路程上明显减少,(用时比为P=0.010.05;距离比P=0.029、0.0030.05)。高剂量组与假手术组比较无差异(用时对比P=0.6750.05;距离对比P=0.3040.05)。②空间搜索实验:平台有效区停留时间和距离AGNHP高剂量组比低剂量组和创伤组长(时间P=0.022、0.0030.05;距离P=0.006、0.0090.05),而对于假手术组无差异(时间P=0.3750.05)。低剂量组比假手术组平台有效停留时间,距离少(时间P=0.0030.05;距离P=0.0130.05)。假手术组平台有效区停留时间长于创伤组(P=0.0180.05)。低剂量组比假手术组平台有效停留距离少(P=0.0130.05),而对于创伤组无差异性(P=0.8780.05)。3大鼠海马DG区神经细胞超微结构:创伤14天肿胀缓解,神经元细胞异型明显,AGNHP治疗14天高剂量,低剂量差异不明显,但神经元细胞异型明显好于创伤组。 结论:AGNHP在大鼠TBl后通过抑制海马DG区calpainⅡ和caspase3激活或其生物学效能,减轻神经细胞超微结构改变,发挥空间学习、记忆神经功能的保护作用。


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