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嗜酸乳杆菌对人舌癌细胞增殖的影响

史晓艳  
【摘要】:目的:研究嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus, ATCC4356)对人舌癌细胞(Tca8113)增殖及细胞周期的影响,并初步探索其机理。方法:体外培养人舌癌细胞株(Tca8113),选择行培养基培养嗜酸乳杆菌,提取嗜酸乳杆菌的上清液、热灭活菌液、无细胞提取物、无菌验证后,将嗜酸乳杆菌各组分与细胞共培养,采用倒置显微镜观察嗜酸乳杆菌各组分对人舌癌细胞生长状态及密度影响;通过细胞计数、SRB实验,分析嗜酸乳杆菌各组分对人舌癌细胞增殖的影响;通过流式细胞术检测分析嗜酸乳杆菌各组分对人舌癌细胞周期的影响;通过激光共聚焦显微镜(CLSM)研究嗜酸乳杆菌各组分作用人舌癌细胞后细胞内自由基、Ca~(2+)含量变化,初步探索嗜酸乳杆菌抗癌作用机理。 结果:1、倒置显微镜下观察发现:倍比稀释(1×、4×、16×)的L.acidophilus各组分作用于Tca8113细胞48h后,细胞由菱形、多角形、铺路石状变为细长形,随着加入各组分稀释倍数的增加,实验组细胞密度及形态影响降低。2、通过细胞计数与SRB实验分析:倍比稀释(1×、4×、16×)的L.acidophilus各组分作用人Tca8113细胞48h后,统计结果显示,与对照组比较,各组分均可显著抑制细胞增殖(P<0.01),且抑制力呈浓度依赖性,浓度越高抑制力越强;1×嗜酸乳杆菌各组分作用Tca细胞24h、48h、72h后,统计结果显示,与对照组比较,各组分均可显著抑制细胞增殖(P<0.01),且抑制力呈时间依赖性,时间越长抑制力越强。3、采用流式细胞术研究发现:1×L.acidophilus各组分作用Tca8113细胞48h后,统计结果分析显示,反应细胞增殖活力的PI指数均降低(P<0.01),与对照组比较,差异均有显著性(P<0.01),且1×上清液组PI指数最低。4、通过先进的激光共聚焦显微镜检测分析发现:1×L.acidophilus各组分作用Tca8113细胞48h后细胞内自由基、Ca~(2+)含量均升高(P<0.01)。 结论:1、嗜酸乳杆菌各组分均可抑制人Tca8113细胞增殖,且上清液组抑制细胞增殖能力强于热灭活组和无细胞提取物组。 2、通过检测嗜酸乳杆菌各组分作用人舌癌细胞48h后细胞自由基、Ca~(2+)含量变化,我们推测,嗜酸乳杆菌各组分抑制人Tca8113细胞增殖、诱导细胞凋亡,可能与细胞内自由基含量升高、Ca~(2+)含量增多有关。


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