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肾精亏虚对机体生长发育和脑组织抗氧化功能影响及其补肾治疗的实验研究

姚军孝  
【摘要】:目的:用恐伤肾联合力竭游泳法建造肾精亏虚证动物模型,研究肾精亏虚证小鼠生长发育状况,以及脑组织抗氧化能力等,探讨滋补肾精方对肾精不足证小鼠生长发育的影响及其治疗作用。 方法:1.将50只小鼠常规饲养三天后随机分为正常组(normal group,NG)、模型组(model group,MG)、金匮肾气丸组(Jinkui Shenqi Wan group,JKG)以及滋补肾精方高剂量组(high-dose Modified Zibu Shenjing Fang group,HDG)、滋补肾精方低剂量组(lower-dose Modified Zibu Shenjing Fang group,LDG),共5组,每组10只。除正常组外,其它各组均置于猫笼之下,与猫仅一网之隔,鼠与猫24h共处进行恐吓。此外,每天早晚各用一只活鼠喂猫示众,连续恐吓21d。并于每日下午2点在水深30cm(25℃)、容积10000ml的塑料缸内强迫小鼠游泳,至无力下沉时捞出,以被动诱导劳倦过度。造模同时,模型组每天灌胃生理盐水(0.2ml·kg-1·d-1),金匮肾气丸组每天灌胃金匮肾气丸混悬液(2.7g·kg-1·d-1),滋补肾精方高剂量组与低剂量组每天灌胃滋补肾精方(20g·kg-1·d-1、10g·kg-1·d-1),正常组不做任何处理,自由摄食饮水,连续21d。观察小鼠皮毛、神态、活动度及灌胃配合状况,并每天记录摄食量、饮水量、游泳时间、称量小鼠体质量,处死后测量股骨长度并称量股骨加股四头肌重量。用考马斯法测定蛋白浓度,使用酶联免疫吸附法(ELISA)测量血清瘦素(Leptin)、脑组织瘦素受体(Leptin receptor,Ob-R)、神经肽Y(Neuropeptide Y,NPY)含量。 2.实验动物分组、造模及给药与1相同。用考马斯法测定蛋白浓度,用硫代巴比妥法测量脑组织中丙二醛(MDA),用黄嘌呤氧化酶法检测脑组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、用分光光度法测脑组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性。 结果:模型组小鼠活动减少,行动迟缓,易受惊吓,反应迟钝,腰背蜷缩,拥挤扎堆,体毛枯疏、晦暗或发黄无光泽,采食量及饮水量明显减少;经测量模型组体重减轻、游泳耐力时间下降,股骨长度及股骨加股四头肌重量降低。血清Leptin含量升高;脑组织Ob-R活性升高,NPY活性降低,T-SOD、GSH-PX活性减弱,MDA活性升高。使用金匮肾气丸和滋补肾精方治疗后,可明显改善小鼠肾精不足证的证候表现,提高小鼠摄食量、饮水量和体质量,增强游泳耐力,增加股骨长度及股骨加股四头肌重量,降低血清Leptin和脑组织Ob-R浓度、升高NPY活性;升高脑组织SOD和GSH-Px含量、降低MDA活性。 结论:肾精亏虚证时机体的生长发育迟缓,脑组织抗氧化功能减退,Leptin—Ob-R—NPY轴调节功能减弱;补肾可调节机体的生长发育和改善脑组织抗氧化功能,改善Leptin—Ob-R—NPY轴的调节功能。


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