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山羊颞下颌关节盘及细胞自组装基体生物化学研究

马彬  
【摘要】:目的:颞下颌关节盘是影响口颌系统铰链咬合运动及咀嚼效能的组织,了解其解剖结构、胞外基质成分,利用生物化学研究方法确定原生关节盘不同受力区域内生物化学含量的异同,利用自组装技术构建颞下颌关节盘自组装球状基体,测定其生物化学含量,并与原生关节盘进行比较,探究形成机制,为指导仿生原生关节盘以及组织工程化提供数据支持。方法:采用丙酮脱水法测定原生关节盘及自组装基体的水含量;山羊颞下颌关节盘的原生试样分为外侧区域、内侧区域、前带区域、中带区域和后带区域的五部分后对通过紫外分光光度法测定试样各区域间的胶原蛋白、蛋白多糖、硫化糖胺多糖的检测,比较各区域之间差异。利用琼脂糖井提供自组装空间,使得颞下颌关节盘细胞相互聚合形成球状基体,观察基体形态,测定基体直径及生物化学指标。结果:1、原生关节盘不同水含量(77.04%±1.24%);胶原蛋白的含量分别外侧带0.71±0.43μg/ml、内侧带1.09±0.14μg/ml、前带2.78±0.52μg/ml、中间带3.48±0.33μg/ml、后带2.77±0.57μg/ml,五个区域中除了前带和后带之间不存在统计学意义(p0.05)之外其余各带之间差异均有统计学意义(p0.05);蛋白多糖含量分别为外侧带0.92±0.01μg/ml、内侧带0.94±0.01μg/ml、前带0.92±0.01μg/ml、中间带0.95±0.01μg/ml、后带0.91±0.01μg/ml,外侧带与中间相比较带有统计学意义(p0.05)与其他带均无统计学意义(p0.05)、内侧带与后带有统计学意义(p0.05)与其他带均无统计学意义(p0.05)、前带与中带、后带均无统计学意义(p0.05)、中带与后带有统计学意义(p0.05);硫化糖胺多糖含量分别外侧带1.29±0.05μg/ml、内侧带1.64±0.04μg/ml、前带1.07±0.05μg/ml、中间带2.26±0.04μg/ml、后带1.87±0.04μg/ml五个区域差异均有显著性(p0.05)。2、细胞自组装基体的直径在2w、4w、6w时分别为1.163±0.029mm、、1.65±0.026mm、1.71±0.035mm;水含量在2、4、6周时分别为90.31±1.1%、89.19±0.9%、90.00±0.7%,与原生关节盘相比较差异有统计学意义(p0.05);胶原含量在2、4、6周时分别为30.064±1.65μg/ml、31.486±1.61μg/ml、35.127±3.45μg/ml,2周、4周、6周胶原蛋白含量有统计学意义(p0.05);蛋白多糖在2、4、6周时含量分别为0.142±0.099μg/ml、0.1468±0.099μg/ml、0.1517±0.110μg/ml,2周、4周、6周蛋白多糖含量有统计学意义(p0.05);GAG的含量在在2、4、6周时含量分别为0.99±0.012μg/ml、0.7386±0.049μg/ml、1.4186±0.071μg/ml,2周、4周、6周硫化糖胺聚糖含量有统计学意义(p0.05)。结论:1、山羊颞下颌关节盘在不同载荷区域内的胶原蛋白、蛋白多糖、硫化糖胺多糖含量具有统计学意义,对于中间带来说其含量呈现特点与力学性能一致;2、山羊颞下颌关节盘细胞自组装基体在生长过程中直径、胶原蛋白、蛋白多糖呈现增长趋势,但GAG含量并未呈现增长趋势;不同区域生化含量以及与自组装基体的含量不同,提示工程化颞下颌关节盘应区分不同区域才能接近原生关节盘;


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