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有机小分子与人血清白蛋白的相互作用研究

唐江宏  
【摘要】:人血清白蛋白(HSA)是体内含量最丰富的运输蛋白质。HSA有许多重要的生理学和药理学功能,能与许多内源和外源性物质如脂肪酸、氨基酸、荷尔蒙、阴阳离子和药物等结合,起到存储和转运作用,因此,HSA已成为研究最广泛的目标蛋白之一。研究毒性物质、药物等小分子配体与HSA的相互作用机理和作用过程,在毒理学、药代动力学上具有重要意义。该领域已成为从事生命科学、化学和临床医学科研工作者共同关注的课题之一。本论文基于开展小分子与蛋白质相互作用的重要意义及国内外研究趋势,在前人工作的基础上,综合利用荧光光谱、紫外-可见吸收光谱、傅里叶变换红外光谱(FTIR)和计算机分子模拟技术,从以下几方面进行了创新性研究: 1.研究了模拟胜利条件下有机毒物敌鼠和四种中药活性组分(甘草次酸、槐角甙、异泽兰黄素和5,7,4′-三羟基-6,3′,5′-三甲氧基黄酮)与HSA的相互作用。根据Stern-Volmer方程和Scatchard方程研究了上述小分子与HSA结合的作用机理(包括荧光猝灭机理、结合常数和结合位点数),讨论了主要作用力类型。 2.研究了实验结果偏离Stern-Volmer曲线的原因。 3.利用FTIR技术考察了小分子对HSA二级结构的影响,获得了作用前后HSA二级结构含量的变化值。 4.用计算机模拟方法研究了以上小分子与HSA的对接,获得与实验一致的结果。 论文共分为五部分: 第一章:简要介绍了蛋白质的结构、功能和性质;综述了小分子物质与蛋白质相互作用的研究方法、研究现状以及不同小分子物质与蛋白质相互作用研究。 第二章:利用荧光光谱和红外光谱研究了模拟生理条件下敌鼠(diphacinone)与人血清白蛋白(HSA)的相互作用。荧光测量结果显示,敌鼠浓度为8.0×10~(-7)~1.8×10~(-6)mol L~(-1)和1.8×10~(-6)~3.2×10~(-6)mol L~(-1)时,Stern-Volmer方程具有两段很好的线性,这两段直线相交于C_(diphacinone)/CHSA≈1.2,并偏向Y轴;在敌鼠实验浓度


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