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若干中草药活性组分与几种球状蛋白质相互作用的研究

何文英  
【摘要】:中药多是组方应用,中药的药效主要体现为方剂的药效,阐明方剂中活性组分发挥作用的物质基础,探讨其作用原理对推进中药现代化、实现中药现代化具有至关重要的意义。蛋白质是生命科学的重要研究对象,从细胞分裂到细胞运动,从代谢到免疫,已知的生物功能没有一个是离开蛋白质能实现的。而作为药物的一种非常重要的运输载体,蛋白质与药物的相互作用不仅影响药物在体内分布,而且还影响药物在体内的代谢与排泄方式;从药物的有效性来看,仅仅是未与蛋白质发生作用的部分具有生物活性,而且药物的药代动力学行为很大程度依赖于键合现象,因此研究药物与蛋白质的相互作用已成为生命科学、化学和临床医学研究领域的重要研究课题之一。在研究药物与蛋白质相互作用的各种方法中,针对测定溶液中的蛋白质分子构象变化主要借助于多种光谱手段和技术,其中,紫外与荧光技术因灵敏度高、选择性强、用样量少、方法简便以及能提供较多的物理参数等优点,在药物与生物大分子之间的相互作用研究中已得到广泛应用;傅立叶变换红外光谱(FTIR)技术是测定蛋白质二级结构的一种强有力手段,适用于不同状态、不同浓度及不同环境中蛋白质的测定;圆二色性光谱(CD)法也是分析蛋白质二级结构的常用手段。本论文在总结前人工作的基础上,综合各种实验技术及化学信息学,主要进行了以下几方面的创新性研究: (1)选择中药活性组分中结构相近或相似的同分异构体体系作为研究对象,结合多种光谱技术以及分子模拟等多种方法进行综合性地研究了它们与不同蛋白质的相互作用; (2)将三种球状蛋白质(血清白蛋白、人免疫球蛋白和溶菌酶)作为模型蛋白,利用以上多种光谱技术定性和定量地研究了药物对蛋白质二级结构的影响; (3)应用傅立叶变换红外光谱技术(FT-IR)中的二阶导数法和曲卷积法,定量分析了不同药物与三种蛋白相互作用时,对蛋白质二级结构的影响变化;并且取得了与圆二色光谱法(CD)基本一致的结果; (4)详细研究了中药活性组分愈创木酚与两种蛋白质相互作用的荧光增强效应,并且用荧光偏振法分析了药物对蛋白质结构在分子水平上的作用情况;


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