核糖体蛋白S10的甲基化对其与B23相互作用的影响

【摘要】： 核糖体负责细胞内蛋白质的合成,其数量和状态跟细胞的生长密切相关。研究表明,核糖体复合体亚基的蛋白很多是被翻译后修饰的,包括磷酸化,甲基化和乙酰化等,这些修饰会影响核糖体的发生或功能,从而调控细胞的生长增殖。核糖体蛋白的甲基化修饰,包括精氨酸残基和赖氨酸残基的甲基化修饰,而精氨酸的ω-N~G的甲基化是由蛋白质精氨酸甲基化转移酶(Protein argininemethyltransferase,PRMTs)催化形成的。蛋白质精氨酸甲基化转移酶5(Proteinarginine methyltransferase 5,PRMT5)是甲基化转移酶家族成员之一,可以通过对底物蛋白质的精氨酸甲基化修饰来调节其功能。 我们先前的研究已证明,核糖体蛋白S10(Ribosomal Protein S10,RPS10)在核内定位于核仁区域,57%集中在核仁颗粒组分区,其余的43%定位于核仁致密纤维组分区;而R158/160K突变体则全部集中于核仁致密纤维组分区。本研究的结论:Ⅰ.通过甲基化实验,发现PRMT5能甲基化RPS10的158和160位精氨酸。Ⅱ.应用免疫共沉淀实验证明,RPS10是一个新的B23结合蛋白,GSTpull-down实验表明这种结合是直接的;而R158/160K甲基化突变体与B23的结合能力减弱。而B23是核仁颗粒组分区的标志蛋白,跟更重要的是,它是一个在核糖体发生中具有重要作用的蛋白。这项研究说明,B23能够选择性的结合甲基化的RPS10,并将其存储在核仁颗粒区。 综上所述,PRMT5可能通过甲基化修饰核糖体蛋白S10,从而影响其与B23蛋白的相互作用,以实现该甲基化酶的下游功能的调节。