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久泻灵颗粒剂治疗溃疡性结肠炎的实验及临床研究

吴玉泓  
【摘要】: 目的 本研究观察了久泻灵颗粒剂(Jiuxieling granules, JXLG)对免疫复合物联合乙酸局部灌注的方法建立的大鼠溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis, UC)模型的结肠组织粘膜脂质过氧化水平、血清炎性细胞因子水平、结肠组织病理改变、结肠组织NF-κB及ICAM-1表达的影响;另外,观察了JXLG对32例溃疡性结肠炎患者的临床疗效及其治疗前后的对肠粘膜IgA, IgG, IgM和补体C3的影响,以探讨JXLG对溃疡性结肠炎的防治作用及其药理机制。 方法 1.采用异种异体结肠黏膜组织致敏法和乙酸局部灌肠相结合的方法制造动物模型。将wistar大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,阳性对照组(Salicylazosul fapyridine, SASP组),JXLG大、中、低剂量组。连续给药14天,末次给药后24h,大鼠股动脉取血分离血清,采用放射免疫法测定大鼠血清及结肠组织匀浆细胞因子IL-4、TNF-a含量及ELISA法测定大鼠血清细胞因子IFN-γ含量。处死大鼠后制备结肠组织匀浆,生化法检测结肠组织中GSH-Px、SOD、MDA、NO、TNOS和iNOS的水平;处死大鼠后同时制备结肠组织标本,病理切片HE染色后进行病理组织学评分;免疫组化切片观察结肠组织NF-κB及ICAM-1的表达。2.将64例患者随机分为治疗组和对照组,治疗组采用纯中药JXLG口服和灌肠治疗,对照组(SASP组)口服西药柳氮磺胺吡啶治疗。两组均以2w为1个疗程,连续服用3个疗程后观察两组治疗前后治疗组总有效率,肠粘膜病变改善情况及IgA, IgG, IgM,补体C3变化情况。 结果 1.JXLG可显著改善肠黏膜炎症,降低病理组织学评分。模型组黏膜层见不同程度充血、水肿、糜烂及出血,浅小溃疡形成,溃疡面有渗出性坏死层,溃疡的周围腺体扩张,腺上皮细胞轻度增生,粘膜下固有层局部充血、水肿,肠壁各层充满浸润的炎性细胞。以中性粒细胞为主。模型组病理组织学评分显著高于正常对照(P0.001)JXLG小、中、大剂量组及阳性对照组溃疡较浅表,溃疡旁上皮修复明显,腺体增生活跃,肠黏膜充血、水肿、糜烂显著改善。还可见较少的炎性细胞浸润。JXLG小、中、大剂量组及阳性对照组病理组织学评分明显降低(P0.05,P0.001)。 2.JXLG不同剂量可使NF-κB及ICAM-1表达减弱。正常对照组仅见微弱的NF-κB表达,模型组NF-κB表达水平明显增高(P0.001),阳性对照组和JXLG大、中剂量组可使结肠NF-κB表达减弱(P0.01,P0.05)。正常对照组肠组织仅见极少量的ICAM-1表达,模型组有明显的ICAM-1阳性表达(P0.01),其阳性细胞积分光密度明显高于正常对照组和药物组(P0.01)。 3.JXLG可明显降低结肠组织中NO、TNOS、iNOS和MDA的活性或水平,升高GSH-Px、SOD的活性。与正常对照组比较,模型组大鼠结肠组织MDA含量升高(P0.01),SOD、GSH-Px计数水平显著降低(P0.01,P0.05);模型组与正常对照组相比NO、TNOS及iNOS含量升高(P0.001);说明急慢性病变复合模型造模成功。与模型组比较,JXLG大、中剂组SOD、GSH-Px计数水平显著升高(P0.01,P0.05),组织MDA含量显著下降(P0.01)。JXLG大、中剂量NO、TNOS和iNOS水平均有下降(P0.001,P0.05),尤以JXLG大剂组作用明显。 4.UC模型大鼠血清IFN-γ含量明显升高(P0.01),JXLG大、中、小剂量组血清IFN-γ含量低于模型大鼠(P0.01 or P0.05);UC模型大鼠血清IL-4含量低于正常对照(P0.01),JXLG大、中剂量组血清IL-4含量高于模型大鼠(P0.01 or P0.05);UC模型大鼠血清TNF-α含量明显升高(P0.01),JXLG大、中剂量组血清TNF-α含量低于模型大鼠(P0.01 or P0.05)。UC模型大鼠结肠粘膜匀浆IL-4含量低于正常对照组(P0.01),JXLG大、中、小剂量组大鼠结肠粘膜匀浆IL-4含量高于模型大鼠(P0.01 or P0.05);UC模型大鼠结肠粘膜匀浆TNF-α含量高于正常对照组(P0.05),JXLG大、中、小剂量组大鼠结肠粘膜匀浆TNF-α含量低于模型大鼠(P0.01 or P0.05)。 5.JXLG能够明显改善临床症状和病灶,提高机体的免疫力和抵抗力,能够降低IgA, IgG, IgM,补体C3值。治疗组总有效率占90.6%,对照组占78.1%。 结论 1.JXLG对溃疡性结肠炎模型大鼠有显著的干预作用,其机制可能与抗氧自由基损伤,抑制NO、TNOS和iNOS生成,及增强抗氧化酶活性有关。JXLG通过抑制NF-κB激活和ICAM-1表达,阻断炎症的放大效应而达到减轻结肠粘膜炎症,是治疗UC的一种有效中药颗粒剂。JXLG可升高IL-4水平而降低IFN-γ和TNF-a水平,对溃疡性结肠炎模型大鼠有较好的治疗作用。 2.JXLG对溃疡性结肠炎有较好的治疗作用,能较好地提高机体的免疫力,应激能力,同时调节胃肠功能紊乱。


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