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红芪多糖抗氧化作用研究

杨小虎  
【摘要】:中药红芪(Radix Hedysari)为豆科植物多序岩黄芪(Hedysarum Polybotrys Hand.-Mazz.)的干燥根。味甘,性温,归肺、脾经。既可生用,也可炙用。具有补气固表、利尿托毒、排脓、敛疮生肌之效。红芪由于产地不同,共有四种,其中以甘肃产的多序岩黄芪为红芪的主流品种,质量最佳,应用最久,在甘肃陇南等地分布极为广泛,既有野生品种,也有栽培品种,被确认为甘肃地道中药材。本研究采用水提醇沉法从甘肃武都产红芪中提取红芪水溶性粗多糖:红芪多糖粗品(Crude Hedysarum polybotrys polysaccharides,CHPS),并用硫酸苯酚法测定了CHPS的总糖含量,从生物学评价角度,选择体外清除自由基反应体系:Fenton反应产生羟自由基(·OH)模型和邻苯三酚自氧化反应产生超氧阴离子自由基(O_2~-.)模型;选择体外抗脂质过氧化反应体系:采用硫代巴比妥酸(TBA)比色法检测CHPS对小鼠肝组织匀浆自发性脂质过氧化的抑制率,比色法测定其对H_2O_2诱导小鼠红细胞溶血抑制率;为探讨CHPS对环磷酰胺(Cyclophosphamide,Cp)免疫抑制小鼠抗氧化能力的影响,将50只小鼠随机分为5组,每组10只,即空白对照组(Ⅰ)、Cp组(Ⅱ)、CP+CHPS低剂量组(Ⅲ)、CP+CHPS中剂量组(Ⅳ)及CP+CHPS高剂量组(Ⅴ),经过相应的处理后,分别测定小鼠肝脏和肾脏匀浆的丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。研究CHPS体外清除自由基作用、体外抗脂质过氧化作用及其体内抗氧化作用。研究结果如下: 1.CHPS的总糖含量及体外对·OH和O_2~-.的影响 测得CHPS的总糖含量为26%;CHPS在该实验研究剂量范围内对·OH的清除作用与浓度呈正相关(P0.01,0.25~8mg/mL),IC_(50)为1.806 mg/mL;对O_2~-.的清除作用亦与其浓度呈正相关(P0.01,1~20mg/mL),其IC_(50)为15.486mg/ml。 2.CHPS对体外抗脂质过氧化影响 CHPS对小鼠肝组织匀浆脂质过氧化作用的抑制率随多糖浓度呈正相关(P0.01,0.125~2mg/mL),但当多糖浓度继续升高时,反而对脂质过氧化作用的抑制率降低;其对过氧化氢诱导的小鼠红细胞溶血的保护率亦与浓度呈正相关(P0.01,2.5~20mg/mL),同样当加大剂量时,甚至有促进溶血的作用。 3.CHPS灌胃对Cp诱导免疫抑制小鼠抗氧化指标的影响 一次注射环磷酰胺1天后,同空白对照组(Ⅰ)比较,Cp组(Ⅱ)小鼠肝肾匀浆中MDA含量显著上升,SOD、GSH-Px活性显著下降(p0.01);预先灌胃6d的不同剂量CHPS的小鼠(Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组),一次注射环磷酰胺1天后,同Cp组比较,肝、肾匀浆中MDA含量显著下降,SOD、GSH-Px活性显著升高(同Ⅱ比较,p0.01)。 综上所述,一定剂量的CHPS在体外对O2-.、·OH的清除作用和抗脂质过氧化作用一致;其对O_2~-.、·OH的清除作用和对过氧化氢诱导的小鼠红细胞溶血的保护作用均较L-抗坏血酸低,而对小鼠肝组织匀浆的自发性脂质过氧化保护作用较L-抗坏血酸高。灌服CHPS能够明显缓解Cp诱导免疫抑制小鼠肝、肾MDA含量上升、SOD和GSH-Px活性下降,提高小鼠的抗氧化能力,提示CHPS具有较好的体内抗氧化作用。表明CHPS能够通过体内清除活性氧和提高抗氧化物酶活性,而提高实验小鼠的抗氧化能力。因此,CHPS具有一定的体内外清除自由基和抗氧化作用。


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