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苹果梨(Pyrus bretchneideri Rehd.)黑斑病潜伏侵染及其预先合成抗菌物质的变化和诱导

李永才  
【摘要】: 黑斑病是造成甘肃省苹果梨(Pyrus bretchneideri Rehd)贮藏期间的主 要病害。本研究采用普通病理、组织病理及病理生理等研究方法系统的研究 了苹果梨黑斑病的主要致腐病原链格孢(Alternaria alternata)的侵染规律、 途径及方式,提取、分离、鉴定了果皮中预先合成的抗菌物质。此外,还初 步研究了采后钙、壳聚糖、水杨酸及热水处理对苹果梨黑斑病的影响及诱导 果皮中抗菌物质生成的关系。 苹果梨黑斑病为典型的潜伏侵染性病害,采后冷藏60d,表面光滑无任 何症状,自采后90d开始,皮孔或萼筒伸出黑灰色菌丝,进而其周围组织坏 死形成黑斑。至采后100d,黑斑病的发病率达28.86%。经鉴定其致腐病原 为链格孢(Alternaria alternata,(Fr)Keissl)。 链格孢在采前可经两条途径侵入苹果梨果实组织而潜伏:一是在花朵开 放时经花柱侵入,在花后50天定殖于花柱的病原菌通过萼室间组织陆续进 入心室,至采收时,心室中链格孢出现率可达45%,二是自果实膨大期开 始经果皮侵入而潜伏于皮下组织,至采收时萼端、中部、梗端链格孢的带菌 率分别为40%、24%和42.8%。 皮孔是链格孢侵入果实组织的主要通道。粘附于皮孔的孢子首先萌发产 生菌丝,随后菌丝进一步增殖侵染,使皮孔表层细胞解体,同时侵入点表皮 及内侧3-4层细胞迅速栓化,限制了菌丝的扩展,使其失去独立性形成椭圆 形、卵形、多角形细胞聚集在一起的“拟薄壁细胞”,并进一步发展成为“微 菌核”,在病程中表现出一段时间的休眠。 膨大期、采收期、采后100d的苹果梨果皮的乙醇(甲醇)—二氯甲烷 粗提取液经TLC分离,以链格孢为指示菌进行生物活性分析均有不同比移 值的抑菌带出现,采用气—质联用法(GC/MS)对其成分进一步分析表明, 三个时期抑菌带成分存在差异。其中棕榈酸甲酯、油酸甲酯、亚油酸甲酯、 鱼鲨烯(三十碳六烯)在膨大期含量最高,随着成熟和衰老的进行,含量逐 渐降低,至采后100d,其含量分别为膨大期的1.8%、7.3%、19%和26.6%。 推测它们可能是生长期间苹果梨果皮中存在的主要抗菌物质。邻苯二甲酸酯 类是采收期和采后100d果皮中含量相对较高的抗菌物质,其中采后100d检 出了6种邻苯二甲酸酯,相对含量高达60%。它们可能为采后果皮中主要 的抗菌物质。 6oCaCI。、lo壳聚糖、45t 20min和50℃10 min热水处理均能有效 地控制苹果梨的黑斑病。而水杨酸处理对苹果梨黑斑病的控制作用不明显。 通过对上述最佳采后处理的苹果梨果皮提取液做TLC生物活性分析,发现 除6%CaCI。外,l%壳聚糖、45C 20min和 50’C 10 min热水处理均可诱导 产生新的抑菌带。


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