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昆虫病原线虫大量繁殖技术研究

李春杰  
【摘要】:昆虫病原线虫(Entomopathogenic nematode)是20世纪初发展起来的一种很有潜能的生物防治因子,但由于繁殖技术不成熟,制约了昆虫病原线虫的大面积推广应用。为了筛选出适应市场需求的昆虫病原线虫繁殖技术,本试验采用不同方法进行大量繁殖,通过评价繁殖线虫的产量、质量、成本和效率,试图找到一种经济而高效的方法,以期为昆虫病原线虫规模化生产提供理论依据和实践指导。 本研究在中国科学院东北地理与农业生态研究所进行,以大蜡螟(Galleria mellonella)为寄主昆虫的White trap传统繁殖线虫法为对照,采用以当地容易获得的黄粉虫(Tenebriomolitor)为寄主昆虫、以布袋为繁殖容器的Lowtek法、以共生细菌——线虫建立的液体繁殖和固体繁殖法大量培养异小杆线虫Heterorhabditis bacteriophora-1(Hb-1)和斯氏线虫Steinernema carpocapsae-2(Sc-2)进行比较。结果如下: Lowtek法以黄粉虫为寄主昆虫,进行活体繁殖线虫,筛选出价格便宜的蛭石为培养介质,Hb-1和Sc-2接种量分别为每克黄粉虫800侵染期线虫(IJs)和1600IJs,培养介质和寄主昆虫(黄粉虫)混合最适比例为3∶2。培养介质不灭菌,繁殖袋不翻动更好;Hb-1在接种第12d和第15d进行收获,Sc-2在接种第10d和第13d进行收获。收获后采用过滤处理进行储存,线虫的存活率明显高于沉淀后直接储存的线虫。 TSYS液体培养,接种单菌线虫是非单菌线虫产量的2.1倍、效率是3.5倍。TSYS液体培养线虫的产量和效率也明显高于PSYG液体培养。液体培养和固体培养Hb-1线虫均在第17d开始收获,Sc-2线虫均在第11d收获。固体培养线虫的产量和效率是液体培养的3.7倍。 从不同方法繁殖线虫产量和质量测定结果可以看出,每克培养基质,固体培养线虫的产量显著高于其他方法,其次是液体培养,而White trap法与Lowtek法的产量较低,二者之间没有显著差异。4种繁殖方法生产的线虫均有良好的致病力,传统的White trap法生产的线虫使大蜡螟致病快,侵染12h后的死亡率显著高于其他方法,但到48h时固体培养法和Lowtek法与White trap法无显著差异。线虫繁殖成本和效率核算结果表明,在不考虑生产必需设备成本和技术人员的专业水平情况下,Lowtek法和固体培养法获得的线虫成本较低,二者之间无显著差异,但固体培养法的效率最高。因此,Hb-1和Sc-2线虫的产量和效率顺序为:固体培养>液体培养>White trap法>Lowtek法,质量顺序为:White trap法>Lowtek法>固体培养>液体培养,成本顺序为:Lowtek法<固体培养<White trap法<液体培养法。


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