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家兔肠道正常微生物的分离培养及特性研究

张振瑞  
【摘要】: 本试验选用不同培养基,对兔肠道微生物进行分离培养,筛选优势菌株,并研究其生长特性。 试验1:选用MRS、MRS+10%泡菜汁四种培养基、MRS+10%家兔软粪浸出液和MRS+10%家兔硬粪浸出液,对断奶仔兔和生长兔回肠、盲肠的微生物分别进行需氧和厌氧培养。根据可培养细菌菌落特征、染色特性和显微镜形态观测对不同菌株进行划线分离,并对纯化菌株进行生化试验,鉴定其种属。结果表明:①MRS+10%家兔软粪浸出液培养基可培养的微生物种类明显高于其他培养基,是分离筛选家兔肠道微生物的适宜培养基。②根据菌落形态,革兰氏染色特性及显微镜形态观测,共分离出37株菌株,其中需氧菌22株,厌氧菌15株。结合生化试验综合鉴定,在需氧菌株中,分离出大肠杆菌属2株,粪球菌属2株,肠球菌属1株,显核菌属1株,短乳杆菌属2株,布氏乳杆菌属1株,蜡状芽孢杆菌1株,唾液乳杆菌1株,柠檬酸细菌属2株,其余9株未鉴定。厌氧菌株中,梭杆菌属3株,双歧杆菌属2株,韦荣氏球菌属1株,乳杆菌属2株,明串球菌属2株,乳球菌属1株,拟杆菌属2株,其余2株未鉴定。③筛选的13株优势菌株中需氧菌7株,分别为粪球菌属2株,肠球菌属1株,乳杆菌属2株,2株未鉴定种属;厌氧菌6株,分别为梭杆菌属1株,双歧杆菌属1株,乳杆菌属1株,乳球菌属1株,明串球菌属1株,拟杆菌属1株。④断奶仔兔盲肠中需氧菌株数极显著高于回肠(P﹤0.01),厌氧菌株数稍高于回肠,但差异不显著;青年兔盲肠中需氧菌和厌氧菌株数均显著高于回肠(P﹤0.05)。 试验2:对所得安全菌株的生长曲线、耐酸、耐胆盐能力,以及对抗生素的敏感性研究表明:①初选菌株中1株粪球菌开始生长较慢,其他菌株生长在4~6h都达到生长高峰,增殖速度快。②菌株的生长速度随pH降低而下降,但所有初选菌株在pH =2时仍然都能存活。③随着胆盐浓度增加和处理时间延长,各菌株存活率下降,胆盐浓度为2%,2h后所有菌株均不能生长。④初选菌株中,除乳球菌属对青霉素钠敏感性较低外,其余的5个菌株对硫酸卡那霉素、硫酸新霉素、青霉素钠、氯霉素、红霉素、硫酸链霉素均敏感。


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