收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

长角血蜱生物学特性研究及免疫原基因的筛选

李知新  
【摘要】: 长角血蜱是我国流行最广泛的蜱种之一,主要叮咬牛、羊以及多种脊椎动物,是病毒、立克次氏体、螺旋体、细菌、原虫、支原体、以及衣原体等多种重要病原的传播媒介,主要影响家畜的生产性能,为畜牧业的发展造成极为严重的危害,具有重要的流行病学意义。 本研究旨在实验室条件调查我国北方长角血蜱甘肃株的生物学特性,在此基础上构建卵的cDNA文库,利用免疫学方法筛选克隆免疫原基因。获得以下结果: 1、长角血蜱为三宿主型,完成一个世代需101~148d;成年饥饿雌蜱吸血期具有两个显著特征:缓慢和快速吸血;不同饲喂条件下长角血蜱饱血体重、产卵量差异极显著(P0.01),饱血体重越大,产卵量越大;经兔体叮咬的成年雌蜱其饱血体重小于羊体。在一定温度范围内,幼蜱、若蜱的蜕皮时间随温度升高而缩短;当饱血雌蜱处于发育阶段时,产卵前期、产卵期及卵的孵化期都随着温度的升高而缩短;16℃~30℃条件下长角血蜱产卵量没有变化,利于蜱存活;4℃以下和45℃以上饱血蜱及其后代不能存活,而饥饿蜱可以存活;16℃以下蜱的发育周期延长。随着湿度增加产卵量增加,70%相对湿度以下发育周期均延长。结果表明,雄蜱可以帮助雌蜱吸血,蜱自身因素和外界因素对长角血蜱的发育繁殖有影响。 2、孤雌生殖的长角血蜱也为三宿主型;在兔体完成一个世代共需106~154d,饥饿期的幼蜱、若蜱与两性生殖的饥饿幼蜱、若蜱体重差异不显著(P0.05),而饱血体重与两性生殖的长角血蜱种群饱血体重差异极显著(P0.01);雌蜱饱血体重可达吸血前的108.46±19.72倍,与两性生殖的种群饱血体重差异亦极显著(P0.01)。雌蜱产卵量与饱食体重之间呈极显著的正相关r=0.8970(P0.01);生殖效率指数REI=6.76,生殖适合度指数RFI=6.29;蜱发育时间在不同季节无明显变化。 3、利用单、双向琼脂糖凝胶扩散试验检测各长角血蜱饥饿雄蜱蛋白阳性血清的滴度,结果表明,用成年长角血蜱雄蜱蛋白在家兔淋巴内外注射制备的两种抗血清,其抗体效价分别达1:128、1:64,可判定为阳性血清;检测直接用雄蜱叮咬兔子制备的血清抗体效价为1:8。雄性成蜱抗原与卵、幼蜱、若蜱抗原免疫动物制备的血清之间存在交叉免疫。淋巴内免疫制备的血清更适合于长角血蜱cDNA表达文库的免疫学筛选。 4、所构建的长角血蜱卵的cDNA文库的库容量约为4.0×106pfu,重组率为99%,扩增后文库的滴度为9.07×1010pfu/ml。对文库用已知的促卵泡激素引物进行扩增,得到长角血蜱促卵泡激素全长cDNA序列。与GenBank中的长角血蜱促卵泡激素(DQ248886)的核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别为97.8%和99%。说明所构建的长角血蜱卵cDNA表达文库库容量大、重组率高,为筛选功能基因奠定了基础。 5、免疫筛选获得12个阳性克隆。经Genbank blast序列比对确证后,认为3个为长角血蜱免疫原基因,还有4个基因分别是热休克蛋白、rRNA串联重复序列、组胺激酶和假定蛋白,其余克隆与Genbank数据库中的序列无明显的同源性,有待进一步研究。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 李知新;刘光远;田占成;谢俊仁;;不同饲喂方式和温度对长角血蜱甘肃株生物学特性的影响[J];动物医学进展;2010年05期
2 王振宝;吾仁其米克;巴音查汗;;硬蜱生物学特性研究概况[J];草食家畜;2008年02期
3 周勇志;周金林;沈杰;;硬蜱的实验室饲养繁殖技术和常见问题[J];动物医学进展;2006年08期
4 张兆凤;;庄河鸡觅食力观察试验报告[J];吉林农业科学;1964年01期
5 龚畿道;张凤桐;;分枝大紅穗的生物学特性和栽培特点[J];辽宁农业科学;1964年06期
6 ;大鲵的資源調查[J];淡水渔业;1974年02期
7 何继龙;王柏生;李秀美;张志连;朱林龙;;菜粉蝶绒茧蜂生物学特性的初步研究[J];上海交通大学学报(农业科学版);1986年04期
8 苏贵兴;;扁桃生物学特性的观察[J];山西果树;1986年03期
9 ;文摘选[J];中国森林病虫;1987年03期
10 张永清;程炳嵩;;忍冬开花生物学特性的观察[J];特产研究;1988年03期
11 王辑健;海南长瓣蝉生物学特性的初步研究[J];广西植保;1989年01期
12 ;森林病虫通讯一九八九年总目录[J];中国森林病虫;1989年04期
13 陈天铎;赵子珊;黄渌漪;;福建省微小牛蜱的生物学特性[J];福建农林大学学报(自然科学版);1989年04期
14 邢章美;北美红杉生物学特性的观察[J];浙江林业科技;1990年04期
15 孙祥贵;鱼用高产饲草栽培管理技术[J];中国水产;1991年03期
16 谢丙炎,欧阳本友,欧阳丰;辣椒炭疽病菌生物学特性的研究[J];微生物学通报;1992年06期
17 吴汉斌;孙鹤年;;卷丹的生物学特性与栽培技术要点[J];现代中药研究与实践;1992年02期
18 欧晓红;吴铱;;杧果切叶象生物学特性及治理措施[J];西南林学院学报;1992年01期
19 韩桂彪;;柿绵粉蚧生物学特性及防治技术研究[J];山西农业大学学报(自然科学版);1992年03期
20 刘益康,王冰,金云鹏;落叶松球果瘿蚊生物学特性的研究[J];林业科技;1993年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李铁拴;王宗仪;高阳历;李双安;李三星;杨芷云;;河北省长角血蜱的生物学特性及药敏试验研究[A];中国动物科学研究——中国动物学会第十四届会员代表大会及中国动物学会65周年年会论文集[C];1999年
2 李志生;郭建铭;陈躬国;林原;王正荣;陈秀娟;林彗星;关志德;;金福菇生物学特性与栽培特性的研究[A];首届海峡两岸食(药)用菌学术研讨会论文集[C];2005年
3 王桂荣;;泡桐叶甲生物学特性与防治[A];华中昆虫研究(第一卷)[C];2002年
4 吴向辉;高智谋;潘月敏;陈方新;陆保君;;紫外光诱导苎麻疫霉抗甲霜灵突变及对苎麻疫霉生物学特性的影响[A];中国植物病理学会2008年学术年会论文集[C];2008年
5 宫雪莲;白春雨;王磊;李方华;关伟军;马月辉;;北京油鸡脂肪干细胞的分离培养及生物学特性研究[A];中国动物遗传育种研究进展——第十五次全国动物遗传育种学术讨论会论文集[C];2009年
6 刘军须;刘福英;蔡月花;王秀芳;吕占军;;不同来源H_(22)细胞株的生物学特性比较研究[A];中国实验动物学会第五届学术年会论文汇编[C];2000年
7 徐有志;;舞毒蛾的生物学特性观察与防治[A];全国园林植物保护第十次学术讨论会论文摘要集[C];2001年
8 独军政;陈怀涛;刘胜旺;孔宪刚;;鸡白细胞介素15的研究进展[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分第12次暨中国动物病理生理学专业委员会第11次学术讨论会论文集[C];2003年
9 高凌寒;刘芳莉;傅松滨;李璞;李钰;;RAB5A反义RNA对人肺腺癌细胞系L18生物学特性的影响[A];中国的遗传学研究——中国遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2003年
10 王荣军;茹宝瑞;张龙现;宁长申;韩立;菅复春;赵金凤;;爬行动物隐孢子虫生物学特性研究进展[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第九次学术研讨会论文摘要集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王达;对光肩星天牛幼虫高致病力绿僵菌菌株筛选及其致病机理研究[D];河北农业大学;2009年
2 周婷;狄斯瓦螨的生物学特性及在我国的自然分布[D];中国农业大学;2005年
3 李海龙;长角血蜱雌蜱唾液腺蛋白质及激素调控的研究[D];河北师范大学;2005年
4 黄定强;骨髓间充质干细胞定向诱导分化的实验研究[D];四川大学;2004年
5 吴福泉;甜菜夜蛾NPV在昆虫细胞的增殖及生物学特性研究[D];华南农业大学;2001年
6 李艳菊;元宝枫繁育技术与应用研究[D];北京林业大学;2005年
7 王志娟;木材变色菌的生物学特性及其防治[D];中国林业科学研究院;2005年
8 陶英群;应用生物芯片技术对脑膜瘤生物学特性的初步研究[D];第二军医大学;2005年
9 杨洪;松褐天牛Monochamus alternatus Hope生物学特性和交配行为的研究[D];西南大学;2006年
10 周霞;肠球菌性羔羊脑炎的发现及其病原特性和诊断方法研究[D];四川农业大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李知新;长角血蜱生物学特性研究及免疫原基因的筛选[D];甘肃农业大学;2007年
2 耿艳红;猪链球菌病原分离株生物学特性和DNA指纹分析研究[D];山东农业大学;2005年
3 李秀伟;菏泽柿品种生物学特性及配套技术研究[D];山东农业大学;2006年
4 王网珍;人多发性骨髓瘤患者来源的DCs的体外诱导及生物学特性研究[D];苏州大学;2006年
5 任勇;饲草玉米生物学特性及饲用营养价值研究[D];四川农业大学;2006年
6 胡松奇;重组增效蛋白的广谱增效活性及其若干生物学特性[D];湖南农业大学;2006年
7 李俊芳;产维生素B_(12)乳酸菌的筛选及生物学特性的研究[D];内蒙古农业大学;2007年
8 王玲玲;枸杞瘿螨姬小蜂Enderus sp.生物学特性及寄生行为的研究[D];内蒙古农业大学;2007年
9 王子微;荧光假单胞菌噬菌体KS461-2的分离及其生物学特性的研究[D];河北师范大学;2007年
10 王云果;花斑皮蠹的生物学特性及防治技术研究[D];西北农林科技大学;2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 王雪飞;小肝癌疗效缘何徘徊不前[N];健康报;2007年
2 申艳丽;春季花木为何容易枯死[N];中国绿色时报;2007年
3 ;獭兔的生物学特性[N];中国特产报;2003年
4 姚克俭;桃树的生物学特性[N];陕西科技报;2009年
5 ;植物学、生物学特性[N];湖北科技报;2003年
6 灵寿县中药材种植研究所 张合云;把握三点 半夏高产[N];河北科技报;2007年
7 ;猪的生物学特性及猪的品种(2)[N];湖北科技报;2005年
8 ;轮叶黑藻生物学特性[N];江苏农业科技报;2007年
9 郝德权;鸡的生物学特性与合理用药[N];中国畜牧报;2002年
10 赵开典;水牛的生物学特性[N];云南科技报;2003年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978