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山羊弓形虫代谢分泌抗原免疫应答研究

芦赟  
【摘要】: 弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种专性细胞内寄生原虫,宿主广泛,可感染人及多种动物,该病呈全球性分布,对人类健康和畜牧业生产造成严重危害。因此,诊断方法和疫苗研究是弓形虫病防制的当务之急。 为了明确弓形虫代谢分泌抗原(E/SA)对山羊的免疫效果及其机制,本研究将山羊随机分为6组,每组3只,分别为E/SA组、E/SA+CpG组(未乳化)、E/SA+CpG组、E/SA+IL-2组、E/SA+IL-2+CpG组及阴性对照组。分别于免疫前、免疫后2周、免疫后4周、攻虫后1周及攻虫后2周采集山羊外周血并分离血清,分别采用IHA法检测抗体滴度的动态变化,ELISA法检测血清中IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4的水平,同时用ANAE染色法检测外周血中T淋巴细胞的动态变化。结果显示,各免疫组免疫后抗体水平为1:256-1:1024,而阴性对照组为1:0-1:4,说明免疫后免疫组的IHA抗体水平开始上升;免疫前各免疫组的IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4的含量分别为:14.00-18.75、30.91-42.20、10.75-18.30、20.40-24.60,而免疫后各免疫组的IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4的含量分别为:175.40-215.60、89.95-253.80、230.40-301.50、39.20-54.20,阴性对照组分别为16.50-36.56、37.75-58.20、11.85-21.75、21.80-27.60,这表明E/SA免疫可引起机体内源性IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4升高(P0.05);免疫后各免疫组的T淋巴细胞水平分别为:48-55、48-58、49-59、50-60、49-63、对照组为45-46,说明E/SA可刺激山羊机体T淋巴细胞水平上升(P0.05)。各组山羊在免疫4周后分别用弓形虫GJS强毒攻击,结果所有免疫组仅表现一过性低烧(40.1~41.1℃),1~4天恢复,食欲正常;而对照组山羊体温呈稽留高温(41.1~41.7℃),持续4~6天,食欲不振,并且有拉稀症状。该研究表明E/SA可刺激山羊产生较强的细胞免疫和体液免疫应答,具有较好的免疫保护性。该研究为山羊弓形虫疫苗的开发奠定了基础。


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