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毛细管区带电泳手性拆分

刘慧玲  
【摘要】: 手性是自然界的一种普遍现象,尤其是在药物、生物分子和农业用化学品中表现更为突出。随着对由手性化合物立体异构引起的生物活性的不同认识的不断深入,对手性药物和化合物的药理学和毒理学特性的研究受到越来越多的重视,而手性化合物对映异构体的的分离分析是手性化合物研究的关键和基本技术之一。在二十世纪八十年代初期,手性化合物常规的快速分析手段尚未出现。但是,在1990年以后,手性分离技术迅速发展。 液相色谱在手性分离方面的应用取得了许多突破性的工作,但是近年来,毛细管电泳在手性拆分方面的优越性却颇受人们的欢迎。因为毛细管的内径很小,有着良好的散热效能,并允许在毛细管两端加上高电压,所以实现了高效快速的分离。另外在分离过程中样品用量少,可随时更换适于不同样品分离的运行缓冲溶液,溶剂消耗少,成本低。 本论文共由以下五部分组成: 第一章 对毛细管电泳在手性分离方面的研究和应用的进展进行了综述。重点综述了以环糊精及其衍生物和大环抗生素为手性选择剂的毛细管区带电泳的进展情况。 第二章 题为“以环糊精及其衍生物为手性选择剂的毛细管区带电泳分离脱落酸对映体”,研究了不同的手性选择剂(-环糊精、(-环糊精、羟丙基-环糊精和二甲基-环糊精对脱落酸手性识别的能力。同时对缓冲溶液的浓度、pH值、手性选择剂的浓度、温度及其电压对分离的影响进行了考查,优化了分离条件。 第三章 主要研究了以氨基糖苷类抗生素--卡那霉素为手性选择剂的毛细管区带电泳法拆分手性化合物,成功地分离了四种外消旋化合物。同时针对背景缓冲溶液pH值、手性选择剂的浓度、硼酸盐和磷酸盐的浓度等条件对分离的影响进行了系统的优化。我们发现在以卡那霉素为手性选择剂的毛细管区带电泳中,手性化合物的分离必须在添加有机溶剂后,才能够实现。在实验过程中就有机溶剂浓度的对分离的影响进行了考查。 第四章 综述了近年来高效液相色谱-电化学检测在测定生物样品中的应用。该方法具有很高的灵敏度和选择性。在这部分中我们重点综述了反相高效液相色谱-电化学检测在体液测定中的应用。 WP=7 第五章 通过高效液相色谱—电化学检测法测定了电针刺激家兔肾旁穴前后,家兔血浆及脑组织中单胺类神经递质去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺和5-羟色胺含量的变化。研究了神经递质的变化与家兔繁殖能力的关系。该实验采用ODS柱, 流动相为0.02mol/l柠檬酸三钠-0.05mol/l磷酸氢二钠:甲醇=95:5(V/V),用电化学检测器检测。实验证明血浆及脑组织中NE、E、DA和5-HT的含量,在针刺肾旁穴前后都有了显著的变化,说明针刺能激发家兔脑内神经元的活动,导致相应的递质含量的变化,同时使得血浆中相应含量也发生变化。单胺类神经递质含量的变化能引起动物体内雌激素的增加,使兔子的繁殖能力增强。该方法为临床诊断提供了一个简单易行、稳定可靠的生化检验手段。


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