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枸杞多糖对氧化应激诱导2型糖尿病大鼠周围神经细胞凋亡的保护作用及其机制研究

吴庆秋  
【摘要】:研究目的探讨枸杞多糖对氧化应激激活P38MAPK信号转导通路诱导2型糖尿病大鼠周围神经细胞凋亡的保护作用及其机制,为糖尿病周围神经病变的防治探寻新途径。 研究方法8周龄SD雄性大鼠分为正常对照组和造模组。造模组大鼠高脂高糖喂养加小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ 35mg/kg)腹腔注射诱导2型糖尿病大鼠模型,随之分为模型组、枸杞多糖大、小剂量干预组、α-硫辛酸阳性对照组。分别于治疗后4周、8周、10周称体重并尾静脉采血测血糖值。10周后处死大鼠,测定血清中血脂水平;取坐骨神经在光镜和电镜下进行组织学观察;测定血清、坐骨神经组织中超氧化物歧化酶SOD,丙二醛MDA及谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px含量;用免疫组织化学法检测背根神经元细胞中凋亡指标Bcl-2、Bax、P38MAPK及caspase-3表达;并在处死之前检测各组大鼠坐骨神经的传导速度。 研究结果 1、糖尿病模型组大鼠随着病程延长血糖有增高趋势,体重会进行性下降(P0.01),枸杞多糖大、小剂量组对糖尿病大鼠的血糖、体重都有改善作用与同期模型组比较有显著性差异(P0.05),但未能达到正常水平。α-硫辛酸组对糖尿病大鼠血糖、体重无明显改善作用与同期模型组比较无差异性(P0.05)。 2、模型组大鼠与正常对照组相比甘油三酯、总胆固醇及低密度脂蛋白明显升高(P0.01)。枸杞多糖大剂量组有一定降胆固醇的作用与同期模型组比较有统计学意义(P0.05),并和小剂量组有降甘油三脂和低密度脂蛋白及提高高密度脂蛋白的趋势,α-硫辛酸组无降血脂作用。 3、模型组大鼠与正常对照组相比坐骨神经传导速度明显减慢(P0.01),经大剂量枸杞多糖和α-硫辛酸干预后均能提高神经传导速度(P0.05)达到正常水平,两组在治疗效果上差别无显著性意义(P0.05)。 4、模型组大鼠血清、坐骨神经中MDA水平明显高于同期正常组(P0.01),而SOD、GSH-Px水平明显低于同期正常对照组(P0.01)。与同期模型组比较,枸杞多糖大剂量组能够提高血清、坐骨神经组织中SOD、GSH-Px水平(P0.05),虽然未能达到正常水平但与α-硫辛酸对照组比较治疗上无差别(P0.05)。枸杞多糖大剂量组与α-硫辛酸对照组均能降低血清和坐骨神经组织中MDA至正常水平(P0.05)。 5、模型组大鼠与正常对照组相比坐骨神经形态学有明显的损伤反应,经枸杞多糖和α-硫辛酸干预后病变程度明显减轻。 6、糖尿病大鼠背根神经元中Bcl-2表达较同期正常对照组明显减低(P0.01),用枸杞多糖和α-硫辛酸干预后,大鼠背根神经节中Bcl-2的表达增加,以枸杞多糖大剂量组明显,与同期模型对照组相比较差异显著(P0.01),小剂量组和α-硫辛酸组有提高Bcl-2的表达趋势但与同期模型组比较无显著性差异(P0.05)。糖尿病大鼠背根神经元中Bax、P38MAPK及Caspase-3表达较同期正常对照组明显增多(P0.05),经枸杞多糖和α-硫辛酸干预后,大鼠背根神经节中Bax、P38MAPK及Caspase-3的表达减少,以枸杞多糖大剂量组明显,与同期模型对照组相比较差异显著(P0.05)。小剂量组和α-硫辛酸组有减少上述指标的表达趋势但与同期模型组比较无显著性差异(P0.05)。 研究结论 1、枸杞多糖能够改善2型糖尿病大鼠的糖脂代谢紊乱并通过这种作用而改善大鼠的体重。 2、2型糖尿病大鼠DPN发展阶段(10周)出现周围神经结构和功能损伤。氧化应激激活P38MAPK信号转导通路介导背根神经元细胞凋亡可能是导致神经病变发生和发展的中心环节。 3、枸杞多糖可调节机体内的氧化应激状态,通过抑制P38MAPK途径,上调背根神经元细胞中Bcl-2表达,抑制Bax及Caspase-3的表达,从而保护神经细胞免受氧化应激损伤导致的凋亡,进而改善周围神经的结构和功能,这可能是其保护DPN的作用机制之一。


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