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石菖蒲化学成分及神经保护、抑菌活性部位的筛选研究

梁虹  
【摘要】:目的对生品石菖蒲进行系统分离,得到单体化合物;分析比较生品石菖蒲、传统蜜炙品及按《回回药方》炮制的蜜制品三者的化学成分的不同;对石菖蒲生品、两种不同炮制品的神经细胞保护作用与抑菌活性部位进行初步筛选。 方法采用75%乙醇微波提取生品石菖蒲,乙酸乙酯与正丁醇依次萃取提取物,回收溶剂,得到不同萃取部位,利用硅胶、Sephadex LH-20、HPLC与大孔树脂等各种色谱技术进行分离和纯化,利用1D-NMR、2D-NMR等波谱技术对单体化合物进行结构解析;另用75%乙醇超声提取石菖蒲生品与两种蜜制品,分别用乙酸乙酯、正丁醇对提取物进行萃取,采用HPLC法对萃取物化学成分进行比较分析;以去血清和鱼藤酮两个神经细胞损伤模型筛选,比较其对神经细胞的保护作用;采用试管稀释法,研究石菖蒲生品及不同蜜制品的乙酸乙酯和正丁醇萃取物对金黄色葡萄球菌、变形杆菌与绿脓杆菌3种供试菌的抑菌活性。 结果 1.从生品石菖蒲中分离鉴定得到7个单体化合物(结构见Fig.1),分别为菖蒲烯二醇(1),β-细辛醚(2),邻苯二甲酸二丁酯(3),enone(4),细辛醛(5),β-谷甾醇(6),α-细辛醚(7)。 2.两种蜜制石菖蒲均与生品石菖蒲的化学成分存在显著差异,蜜制品的小极性化学成分含量明显低于生品。 3.与鱼藤酮模型组比较,6个实验组细胞存活率均略有降低,但没有统计学差异;与去血清模型组比较,乙酸乙酯层3个实验组细胞存活率均显著下降(P0.01);生品石菖蒲正丁醇萃取物和传统蜜炙品乙酸乙酯萃取物对金黄色葡萄球菌、变形杆菌和绿脓杆菌3种病原菌有较强抑制作用,其他萃取物作用较弱或没有作用。 结论 1.从乙酸乙酯层和正丁醇层系统分离并鉴定了7个单体化合物,包括1个倍半萜、2个甾体以及4个芳香类化合物,其中化合物1、4为首次从石菖蒲中分离得到。 2.《回回药方》蜜煎菖蒲方中对石菖蒲的炮制处理方法,尤其是蜜制前的加工方法比较特殊,与传统中药炮制学上所讲的蜜炙差异很大。通过HPLC分析生品石菖蒲与两种炮制品的化学成分,发现两种蜜炙方法所得提取物存在明显差异,为蜜制石菖蒲与生品石菖蒲的化学成分的进一步研究提供参考依据。 3.初步考察了生品石菖蒲、回蜜制石菖蒲和传统蜜炙石菖蒲的提取物在神经保护方面的药理活性差异。在去血清和鱼藤酮两种毒性所造成的神经细胞损伤模型中,3种提取物均未表现出显著的改善作用。 4.生品石菖蒲正丁醇萃取物和传统蜜炙品乙酸乙酯萃取物均有显著的抑菌活性,而回蜜制各萃取物均无抑菌活性。


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