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宁夏地区耐碳青霉烯类药物肠杆菌科细菌耐药性研究及同源性分析

赵慧铮  
【摘要】:目的:研究本院耐碳青霉烯类药物肠杆菌科细菌的临床分布、耐药情况、耐药基因型及其同源性,为本院抗菌药物的合理使用及院内感染监测等方面提供有效的科学指导。方法:利用WHONET5.6软件统计2011年1月至2013年12月本院分离的肠杆菌科细菌的标本类型、科室分布和耐药性,同时筛查同期分离的耐碳青霉烯的肠杆菌科细菌,对筛查阳性菌株,通过超广谱β-内酰胺酶(Extended-spectrum beta-lactamase,ESBL)表型确证实验检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌是否产ESBL,通过头孢西丁三维实验监测是否产Amp C酶,通过改良Hodge实验检测是否产碳青霉烯酶,通过EDTA协同抑制试验检测是否产金属酶;通过PCR扩增常见的耐药基因(ESBL、Amp C酶基因、碳青霉烯酶基因、喹诺酮类耐药基因及整合子基因);通过质粒接合实验探讨是否可通过接合的方式传递耐药质粒;通过PFGE(Pulsed field gel electrop Horesis)和ERIC-PCR(Enterobacterial repetitive intergenic consensus PCR)探讨耐碳青霉烯的阴沟肠杆菌是否具有同源性。结果:近三年本院共分离到7315株肠杆菌科细菌,其中主要以痰液及咽拭子(46.6%)、脓液及分泌物(13.9%)和尿液(13.0%)等标本为主,科室主要以儿科(17.5%)、呼吸内科(7.1%)和重症监护室(6.4%)为主,菌株主要为大肠埃希菌(40.6%)、肺炎克雷伯菌(32.0%)和阴沟肠杆菌(15.3%);多数药物耐药率较高,仅碳青霉烯类、酶抑制剂类和氨基糖苷类保持着较高的敏感性。同时共筛查到18株耐碳青霉烯的肠杆菌科细菌,其中阴沟肠杆菌10株,奇异变形杆菌3株,肺炎克雷伯菌2株,大肠埃希菌、产气肠杆菌和弗劳地枸橼酸杆菌各1株;ESBL表型确证试验阳性率为66.7%(4/6),Amp C酶阳性率为55.6%(10/18),改良Hodge实验阳性率为72.2%(13/18),EDTA协同抑制试验阳性率为44.4%(8/18);耐药基因扩增结果中,ESBL基因阳性率为66.7%(只要产生任意一种ESBL基因即判为阳性,下同),Amp C酶耐药基因阳性率为55.6%,碳青霉烯酶耐药基因阳性率为77.8%,喹诺酮类耐药基因阳性率为77.8%,I类整合子阳性率为88.9%(16/18),II类整合子阳性率为11.1%(2/18),ISCR(Insertion sequence common region)阳性率为72.2%(13/18);质粒接合实验的阳性率为66.7%(12/18),且接合子的MIC远低于供体菌的MIC;PFGE和ERIC-PCR同源性分析具有较高的一致性,同时表明本院并未存在感染菌株的暴发流行,均为散在分布。结论:本院肠杆菌科细菌耐药率较高,其中耐碳青霉烯的肠杆菌科细菌主要为阴沟肠杆菌,耐碳青霉烯的肠杆菌科细菌可携带多种耐药基因,其中碳青霉烯酶基因以NDM-1和KPC-2为主,且耐药菌株可将耐药质粒传递给敏感菌株;本院耐碳青霉烯的阴沟肠杆菌未出现同一克隆株的暴发流行,呈现散发分布。


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