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葡萄多糖的提取及抑菌、抗衰老活性的研究

周鹏  
【摘要】:本论文以新疆优势资源无核白葡萄为原料,采用水提醇沉法提取其中的活性物质-葡萄多糖VLP(Vitis Linn Polysaccharide)。通过单因素条件选择及正交试验研究了乙醇浓度、温度、时间、料液比及浸提次数对葡萄多糖提取率的影响,从而确定了提取葡萄多糖的最佳工艺参数为:温度95℃,时间2.0h,料液比1:2.0,次数2次,在提取液浓缩至原体积1/10的基础上,用6倍体积的无水乙醇(75%)进行沉淀。脱蛋白试验表明:Sevage法脱蛋白12次较适宜。同时根据最佳提取工艺研究了不同品种葡萄多糖的提取率分别为:无核白2.94%,超大粒无核白2.92%,火焰无核白2.56%,红提2.17%。 所提多糖经脱脂、脱蛋白、透析、真空浓缩、冷冻干燥后,采用苯酚-硫酸法测定其多糖含量。通过单因素条件选择及正交试验研究了显色温度、时间、苯酚及硫酸用量对葡萄多糖含量测定的影响,从而确定了葡萄多糖含量测定的最佳反应条件为:温度为沸水温度,时间15min,苯酚用量1.0ml,硫酸用量8.0ml。葡萄多糖含量以标准葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖计分别为6.60%、7.34%、7.27%。 采用琼脂扩散滤纸片法对8种食品常见菌进行了葡萄多糖的抑菌性试验。结果表明:葡萄多糖对8种食品常见菌具有一定抑制作用,对细菌有较强的抑菌作用,其MIC值分别为:枯草芽孢杆菌12.5 μg/ml,大肠杆菌25μg/ml,金黄色葡萄球菌50 μg/ml;对霉菌的抑制作用不太显著,其MIC值分别为:根霉25 μg/ml,曲霉50μg/ml;对酿酒酵母的抑制作用也较明显,MIC值为25 μg/ml,对青霉和毛霉无抑制作用。葡萄多糖抑菌存在最佳pH值,温度越高,抑菌效果越显著;相同时间内,葡萄多糖溶液浓度越高,抑菌率越高;同一浓度的葡萄多糖溶液,作用时间越长,抑菌率也越高。就枯草芽孢杆菌和大肠杆菌而言,葡萄多糖对革兰氏阳性菌的抑制作用高于革兰氏阴性菌。 同时本论文采用王厚德《老年学试验用果蝇饲养管理方法的研究》中所述方法,以美国野生型黑腹果蝇为抗衰老试验对象,以半数死亡期、平均寿命、最高寿命、脂褐素含量为指标,研究了葡萄多糖的抗衰老活性,结果表明:葡萄多糖能延长果蝇的寿命,其中1.0%的葡萄多糖效果最明显。分别延长雄、雌果蝇半数死亡期为23.41%、24.62%,分别延长雄、雌果蝇的平均寿命为18.69%、21.23%,分别延长雄、雌果蝇的最高寿命为 WP=8 33.21%、32.62%,雄、雌果蝇脂褐素含量分别降低为0.81、0.78μg/g。


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