荷斯坦牛中性粒细胞β-防御素基因克隆及其原核表达质粒的构建

【摘要】： 为研究牛乳腺防御素功能活性,研发牛防御素生物制剂来防治奶牛乳腺炎。根据已发表的牛β-防御素基因序列设计一对引物,从具有临床乳房炎症状的荷斯坦奶牛血液中性粒细胞中用试剂盒提取总RNA。经过反转录PCR(RT-PCR)扩增出牛β-防御素cDNA片段,并克隆到pMD18-T载体。测序结果表明,扩增出的片段含有189bp核苷酸,与已报道的牛β-防御素cDNA序列同源性达96.3%。推导该序列编码63个氨基酸,并含有β-防御素的特征性分子结构即在特定位置上有6个保守的半胱氨酸残基(C)。可以确定该cDNA为β-防御素家族的成员BNBD-7。该基因插入到原核表达载体pQE-30,pET-32a中,构建原核表达质粒,为β-防御素的的表达及功能、活性的研究奠定了一定的基础。

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1	田萍蔡森姚武群;温湿指数（THI）对荷斯坦牛产奶量影响的研究[N];中国畜牧报;2004年
2	全国畜牧总站王志刚　张金松邱小田史建民;中德牛业发展合作项目简介[N];农民日报;2011年
3	于丽萍;优良奶牛的选择[N];西藏日报;2002年
4	韩学梅成彩燕毛清;选购高产奶牛的要点及注意事项[N];山西科技报;2003年
5	太原市小店区亲贤街办兽医站韩六五;提高奶牛生产性能的综合技术措施[N];山西科技报;2009年
6	特约记者田浩通讯员付汝晨;古勒巴格村壮大经济有实招[N];伊犁日报(汉);2008年
7	南京农业大学颜培实教授;“福利”为高产奶牛带来高产[N];中国畜牧报;2004年
8	太原市畜禽繁育工作站李五柱李光宏王新燕成彩燕;浅谈奶牛养殖小区建设中的几个问题[N];山西科技报;2003年
9	记者何德功;日本发现第16头疯牛[N];新华每日电讯;2005年
10	本报记者　田晓明;走出国门，中国乳业正逢时[N];市场报;2004年

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