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库尔勒香梨多糖的提取、分离纯化及抗氧化性质研究

马佩佩  
【摘要】:多糖是重要的具有生物学活性的高分子化合物之一,在自然界分布极为广泛。多糖不仅是能量资源或结构材料,更重要的是其作为一类天然大分子化合物,具有可同核酸和蛋白质相比拟的信息功能,参与生命各种活动,具有抗病毒、抗感染、抗放射等多种生物学功能。新疆种植库尔勒香梨面积广泛,每年在采摘前后的香梨损失量都很大,因此从库尔勒香梨中提取多糖在经济以及减少资源损失上都有广泛的开发前景。本文研究了库尔勒香梨在采摘前后以及贮藏期间的多糖含量的变化隋况,超声波辅助提取、微波辅助提取以及超高压辅助提取三种方法对多糖提取效果的影响,并采用乙醇沉淀,正丁醇、三氯乙酸以及正丁醇-三氯乙酸法去蛋白,以及DEAE-52柱层析对多糖进行分离纯化,HPLC和SephadexG-100凝胶柱层析证实为单一组分,并对多糖的单一组分清除自由基能力进行了研究。研究结果表明: (1)多糖的提取时采用单因素优选实验和响应面分析法,得到超声波辅助提取法提取多糖的最佳工艺条件是:提取时问65 mmin,料液比1:3,提取温度53℃,超声波功率130 W,多糖得率为5.03%;微波辅助提取法提取多糖的最佳工艺条件是:提取时间4 min,料液比1:4,功率500 W时,多糖得率为5.01%;超高压辅助提取法提取多糖的最佳工艺条件是:压力250 MPa,温度50℃,料液比1:3,保压时间4 min时,多糖得率为5.37%。三种辅助提取方法都比传统水浴加热所需时间少,且提取效率高。 (2)库尔勒香梨中的多糖含量具有一定的变化规律,研究结果表明:香梨中的多糖含量在熟前生长期时达到最大,随后又呈下降趋势。 (3)库尔勒香梨多糖的粗提物经醇沉后,采用正丁醇、三氯乙酸以及正丁醇-三氯乙酸法去蛋白,并对其三种方法的去蛋白效果进行比较,结果表明:采用正丁醇-20%三氯乙酸法去蛋白的效果最佳,其多糖损失率和蛋白去除率都在理想范围内,多糖损失率为34.85%,蛋白质去除率为13.75%。 (4)经去蛋白并透析后的多糖溶液过DEAE-52柱层析纯化后,得到两种多糖(XL1和XL2),经HPLC和SephadexG-100凝胶柱层析证实其均为单一组分。 (5)对多糖的两种单一组分清除自由基能力分别进行了研究,结果表明:两种多糖都具有很好的清除超氧自由基和羟自由基的能力,其抗氧化能力与多糖浓度呈线性关系。


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