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限制性液体复苏对失血性休克大鼠肠粘膜及血浆TNF-α、IL-2的影响

王海庆  
【摘要】:目的:本实验通过建立失血性休克动物模型,观察不同液体复苏的状态下,小肠粘膜损伤程度,以及血清中TNF-α, IL-2水平的变化,探讨不同液体复苏对肠粘膜以及炎症因子影响,为失血性休克患者采用液体复苏的方式提供进一步的理论依据。 方法:Sprague-Dawley大鼠55只,随机分为正常对照组(n=10)、限制补液组(n=15)、常规补液组(n=15)、休克组(n=15)。对照组动物仅做穿刺颈动脉、颈静脉,给予插管但不放血,并且观察120min。其他三组动物颈动静脉插管后从颈动脉以每分钟0.2mL/100g的速率放血,使MAP在15min内降至40-45mmHg,然后根据血压的变化放出或回输少量血液以继续维持MAP在40-45mmHg之间15min,制作失血性休克动物模型。在制造休克模型成功后,限制补液组、常规补液组分别经颈静脉输入乳酸林格液维持MAP在60mmHg和90mmHg,并继续维持30min,而休克组不给予输入任何液体,然后在试验的60min后除对照组外均用乳酸林格液与全血按2:1的体积比进行充分复苏并继续维持大鼠血压在休克前水平的90%,并且持续60min。四组均于实验开始的0min,60min.120min分别由颈动脉置管处抽取1mL血液,注入普通管,3000r/min离心5min后取血清,然后采用ELISA法分别测定血清中TNF-α,以及IL-2的含量,并于试验120min时处死动物,无菌操作下开腹,距回肠瓣5cm处取回肠4cm,生理盐水洗净,用10%甲醛固定,常规取材制片,HE以及PAS染色,光镜下观察病理变化。 结果:本实验中,除对照组外其余各组在实验开始后60min血清TNF-α,以及IL-2水平较前均有明显升高(P0.05)。在实验120min时休克组血清TNF-α,以及IL-2水平明显高于其它各组(P0.05),常规补液组两种因子均高于限制补液组以及对照组(P0.05),而限制补液组TNF-α,以及IL-2平高于对照组(P0.05)。小肠组织光镜病理观察结果显示:对照组大鼠小肠粘膜基本正常,仅少数出现绒毛上皮轻度受损,其余三组均有不同程度的绒毛膜损伤,其中以休克组损伤最为严重,镜下可见绒毛两侧有上皮层与固有层大量分离、绒毛破损伴固有层毛细血管暴露及中性粒细胞增多及固有层破坏、出血和溃疡等,在两种液体复苏组中,限制补液组的肠黏膜损伤程度明显小于常规补液组,限制补液组镜下可见绒毛顶端上皮下间隙增大、上皮下间隙扩展,少数为绒毛破损伴有固有层的破坏等,而常规补液组镜下结果兼于限制补液组与休克液组之间。在Chiu氏分级中,对照组损伤级别明显低于其它三组(P0.05),而休克组损伤级别明显高于其它三组(P0.05),在两种液体复苏组之间,常规补液组损伤级别高于限制补液组(P0.05)。 结论:不同液体复苏可有效减轻失血性休克大鼠早期小肠组织肠粘膜损伤程度,并且减轻大鼠全身炎症反应;限制性液体复苏相对于常规液体复苏对失血性休克大鼠早期肠粘膜屏障功能的保护作用,并且减轻全身炎症反应的效果更加明显;本实验提示:在失血性休克后限制性液体复苏与常规液体复苏相比,限制性液体复苏可减轻肠粘膜屏障功能损伤,并能减轻全身的炎症反应。这可为创伤后肠粘膜屏障功能保护和以及SIRS、MODS的防治进一步提供思路。


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