收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

基于新疆甲状腺癌人群的肿瘤分子标记物研究

夏米西努尔·伊力克  
【摘要】:研究目的:甲状腺疾病是多因素内分泌疾病,发病率高,临床表现为结节性甲状腺肿、桥本氏甲状腺炎、甲状腺瘤(良性)和甲状腺癌(恶性),全球范围内有超过3亿的人口患有甲状腺疾病,严重威胁到人类健康。甲状腺癌是内分泌系统最常见的恶性肿瘤,是我国女性易患的十大恶性肿瘤之一,近30年来发病率显著上升。新疆是我国多民族聚集地区,各大医院临床收治的各民族甲状腺癌患者例数有明显上升趋势,但是关于新疆地区甲状腺疾病,尤其是甲状腺癌的发病情况尚未见详细研究报道。甲状腺癌是由上皮细胞起源的内分泌恶性肿瘤,分为乳头癌、滤泡癌、髓样癌和未分化癌,其中乳头癌占整个甲状腺癌80-90%。临床影像学诊断技术是该肿瘤的主要诊断手段,但是无法对许多症状不明显的肿瘤做出早期诊断,而且难以辨别症状相似的良性和恶性肿瘤,往往导致非恰当性治疗。开展甲状腺癌的分子遗传学、分子生物学和免疫学研究,了解该肿瘤发病的分子机理,寻找肿瘤早期诊断或鉴别良性和恶性肿瘤的分子标记物,是建立甲状腺癌分子诊断标准、有效预防和治疗的重要切入点。因此,在本研究的第一阶段,对近8年入院收治患者信息进行统计分析,从甲状腺患者群体发病趋势、性别、年龄和族别差异角度,明确新疆甲状腺疾病或甲状腺癌的特点。第二阶段,经文献查新,选择腺癌特异性变化或腺癌相关基因,利用新疆甲状腺疾病资源,对候选基因的蛋白质表达水平进行进一步筛选,确定甲状腺癌特异性上、下调表达基因指标,评价其对甲状腺癌病变的标记作用。第三阶段,选择“第二阶段”研究结果中,具有甲状腺癌特异性下调表达或缺失的基因指标,应用Sequenom MassARRAY甲基化DNA定量分析平台,通过甲状腺乳头癌的候选基因启动子区甲基化水平分析,寻找基于基因高甲基化的甲状腺癌特异性分子标记物。方法:1.收集新疆医科大学第一附属医院2002~2009年间收治的甲状腺疾病患者病例资料6071例,包括甲状腺良性病变5865例,甲状腺癌206例。年龄分布1~91岁,男性1707例,女性4364例。汉族4101例,维吾尔族1160例,其他民族810例。用SPSS13.0及Microsoft Excel 2007软件,分析方法采用x~2检验,检验水准α=0.05。2.收集新疆医科大学第一附属医院在2004年~2010年收治的甲状腺疾病患者的石蜡包埋组织标本共195例,其中不同组织类型的甲状腺癌112例,甲状腺腺瘤26例,桥本氏甲状腺炎15例,结节性甲状腺肿10例,正常甲状腺组织32例。选择11种腺癌特异性上或下调表达候选基因CDH1、MGMT、TIMP3、MLH1、ESR1、DAPK1、APC、RARB、CDKN2A、CALCA和MSX1,应用特异性抗体和免疫组织化学S-P法分析每一个基因的蛋白表达水平。3.研究改良的石蜡包埋组织DNA提取方法,从49例甲状腺乳头癌和23例正常组织的石蜡切片中,提取高质量基因组DNA。设计5种候选基因启动子区CpG岛片段特异性PCR引物,应用Sequenom MassARRAY甲基化DNA定量分析平台,对组织DNA进行甲基化水平定量分析。结果:1、2002~2009年间甲状腺疾病的发病率上升趋势非常明显(2002年282和2009年1238例),其中甲状腺癌所占比例很小(3.39%),良性病变占主导地位(96.61%),而良性病变主要是甲状腺机能亢进和甲状腺肿(48%和40%)。甲状腺癌主要是乳头状癌(81%)和滤泡癌(14%)。甲状腺疾病发病的年龄有性别及其年龄差异,男女比例为1/2.56,有统计学差异(P0.05)。维、汉民族的甲状腺癌发病比例差异很大,但是其总体分布无明显差异。2、(1)免疫组织化学和统计分析显示,从正常到结节性甲状腺肿、桥本氏甲状腺炎、甲状腺瘤和甲状腺癌患者组,CDH1、MLH1、TIMP3和DAPK1等四种基因的蛋白质表达水平(阳性率)明显递减,其组间差异显著(P0.05);ESR1、MGMT和RARβ等三种基因的蛋白质表达水平变化与此相反,呈明显的上升趋势,其差异也有统计学意义(P0.05),而APC基因的蛋白表达水平无差异(P0.05)。(2)从不同甲状腺癌的临床病理参数角度分析,CDH1蛋白质上调表达或ESR1下调表达水平差异与肿瘤预后密切相关;ESR1蛋白表达与不同肿瘤组织类型密切相关即该蛋白在甲状腺乳头癌中高表达,同时ESR1蛋白表达与临床分期密切相关;DAPK1、ESR1、RARβ蛋白表达水平差异与淋巴结转移相关。故CDH1、ESR1、DAPK1和RARβ蛋白表达水平变化可能成为甲状腺癌组织分型、临床分期、淋巴结转移或预后的检测指标,特别是ESR1蛋白表达与甲状腺癌的组织类型、临床分期、淋巴转移和预后指数有关的重要指标。(3)从甲状腺乳头癌角度分析,CDH1、MLH1、TIMP3、DAPK1、ESR1、MGMT和RARβ等7种基因表达水平变化具有甲状腺乳头癌特异性,与正常比较存在明显差异,且具有统计学意义(P0.05)。此外,CALCA基因在甲状腺乳头癌组织中表达阳性率高,与正常对照组相比有显著差异,而CDKN2A和MSX1基因的表达水平变化无差异。(4)作为肿瘤特异性基因指标,CDH1与MLH1、MLH1与TIMP3、RARβ与ESR1、RARβ与MGMT及CDKN2A与CALCA蛋白表达水平趋势存在不程度相关性(0.4r0.7,P0.01)。(5)从甲状腺癌联合检测角度分析7种候选基因的单一基因或基因组合的蛋白质表达水平关系,发现ESR1、RARβ和MGMT单一基因表达就有较高的灵敏度(64.1、76.2、62.2%)、特异度(83.3、66.7、83.3%)和准确度(67.1、65.8、74.7%),其余单 一基因均较低。ESR1/RARβ/MGMT三者联合检测甲状腺癌的灵敏度、特异度和准确度很高(67.6、77.8、69.2%),是较高组合,而CDH1、MLH1、TIMP3和DAPK1基因的四者组合是较低组合(41.1、20.9、37.8%),但是两两组合分析中也有比较高的组合如TIMP3/CDH1(46.5、25.0、43.2%)、TIMP3/MLH1(44.1、25.0、40.8%),其余组合均为低组合。3、利用改良的石蜡包埋组织DNA提取方法,我们获得了质检合格的高质量基因组DNA。通过甲状腺乳头癌和正常对照DNA的甲基化DNA定量测试(Sequenom MassArray质谱技术)和数据分析,发现只有TIMP3基因启动子区CpG岛片段(目的片段)甲基化水平定量差异显著(P0.05),而RARB、CALCA、CDH1和MLH等4种基因的目的片段甲基化无统计学差异(P0.05)。进一步分析CpG位点的单点甲基化水平差异,看出TIMP3基因的目的片段的CpG-7/CpG-8(联合位点)和CpG-9等三个CpG位点甲基化率在肿瘤与正常对照及临床分期之间均有统计学差异(P0.05或P0.01)。结论:1.新疆地区甲状腺疾病的发病率呈上升趋势,女性患病率高于男性并且女性甲状腺癌发病年龄早于男性。良性病变是甲状腺疾病的主题,甲状腺癌所占比例极小,甲状腺机能亢进在良性病变居首位,乳头癌是甲状腺癌主题。虽然新疆甲状腺疾病或甲状腺癌患者群体总体分布无明显的年龄或民族差异,但是维、汉两族的甲状腺癌的构成比例差异很大,而且维吾尔族男女比例高于汉族。2.CDH1、MLH1、TIMP3和DAPK1等四种基因的蛋白质表达水平下调或ESR1、MGMT和RARβ等三种基因上调可能是甲状腺癌特异的分子标记物,其中CDH1、MLH1、TIMP3、DAPK1、ESR1、MGMT和RARβ等基因的表达水平变化更具有甲状腺乳头癌特异性。CDH1、ESR1、DAPK1和RARβ蛋白表达水平变化可能成为甲状腺癌预后、组织分型或淋巴结转移的检测指标,特别是其中ESR1蛋白表达与以上所有参数有关,而以上分子标记物中CDH1、MLH1、TIMP3、RARβ、ESR1、MGMT、CDKN2A和CALCA蛋白表达水平趋势存在一定的相关性。以ESR1、RARβ和MGMT三者联合检测甲状腺癌可以大大提高其检测灵敏度、特异度和准确度,TIMP3与CDH1或MLH1的组合也在较大程度上具有联合检测的意义。3.TIMP3基因启动子区CpG岛发生甲基化是甲状腺乳头癌特异的表观遗传学变化,可能是该蛋白质表达下调或表达缺失的重要原因,但是基因启动子去甲基化可能与RARB、CALCA、CDH1和MLH1基因的表达下调或上调无关。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 许晨;赵文川;;甲状腺癌分子标记物研究进展[J];现代肿瘤医学;2006年03期
2 陆保成;邵信保;;甲状腺癌颈清扫术的并发症(附75例分析)[J];江苏医药;1979年Z1期
3 文锦;;甲状腺癌[J];医学通讯;1977年00期
4 刘益明;何三光;董雨亭;沈魁;;甲状腺癌颈部廓清术60例分析[J];中国实用外科杂志;1985年09期
5 苟昭映;;迷位甲状腺癌1例[J];中国肿瘤临床;1988年05期
6 马春蕾;蒲章杰;吴玉坤;樊忠;;咽侧甲状腺癌误诊原因分析[J];滨州医学院学报;1992年01期
7 王翠芳;李冠群;姜卫国;;滤泡上皮源性甲状腺癌的性类固醇激素受体的临床病理研究[J];实用肿瘤杂志;1993年03期
8 徐平,华南;甲状腺癌19例误诊原因分析[J];中国社区医师;1994年07期
9 ;甲状腺肿瘤[J];国外科技资料目录(医药卫生);1998年07期
10 张海;王可敬;;气管重建术治疗气管受侵的晚期甲状腺癌[J];中国基层医药;2005年11期
11 陈雨信;曾庆东;;甲状腺癌的内分泌治疗[J];临床外科杂志;2006年03期
12 张友逊;马秀萍;赵海龙;;结节性甲状腺肿合并甲状腺癌的诊断与治疗[J];中国乡村医药;2006年01期
13 志远;;结肠癌远处转移到肺和甲状腺[J];中华医学信息导报;2006年04期
14 盖宝东;森隆弘;膝盛启成;大内宪名;里见进;张德恒;郑泽霖;;散发型甲状腺髓样癌酪氨酸激酶受体基因第918位点基因突变及意义[J];中华实验外科杂志;2006年03期
15 张钧;李鸣;李平;;手术治疗125例分化性甲状腺癌的5年随访结果分析[J];西南国防医药;2007年04期
16 周晓聪;叶正亮;罗定存;张学淼;倪耀忠;;甲状腺乳头状癌术后伴颅内 肺 肌肉 骨转移1例[J];中国实用外科杂志;2008年07期
17 任秋红;张英迅;;TG.TG.-Ab.在甲状腺癌中的监测随访探讨[J];中国伤残医学;2008年05期
18 马九强;;分化型甲状腺癌二次手术的疗效[J];临床医学;2010年01期
19 杨义鹏;尚云龙;张德玉;;青年甲状腺癌患者39例治疗体会[J];海军医学杂志;2010年03期
20 孙辉;刘晓莉;;全甲状腺切除术治疗甲状腺癌适应证选择及并发症防治[J];中国实用外科杂志;2011年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 徐易;程文;;高频超声与CT诊断甲状腺癌的影像对比分析[A];中华医学会第十次全国超声医学学术会议论文汇编[C];2009年
2 刘晓婷;那丽莉;于韬;邬晓明;高岿然;邓元;;甲状腺癌超声诊断价值分析[A];中国超声医学工程学会第三次全国浅表器官及外周血管超声医学学术会议(高峰论坛)论文汇编[C];2011年
3 刘珂;田海燕;;彩色多普勒超声在甲状腺癌诊断中的应用[A];庆祝中国超声诊断50年暨第十届全国超声医学学术会议论文汇编[C];2008年
4 黄道中;;98例甲状腺癌的超声诊断及鉴别[A];庆祝中国超声诊断50年暨第十届全国超声医学学术会议论文汇编[C];2008年
5 林岩松;;失分化甲状腺癌的靶向治疗[A];中华医学会第九次全国核医学学术会议论文摘要汇编[C];2011年
6 王芬;陈敏;黄雅芳;高毅;邱月芳;王伯华;常才;;甲状腺癌声像图特征及漏误诊分析[A];第二届长三角超声医学论坛暨2009年浙江省超声医学学术年会论文汇编[C];2009年
7 王芬;陈敏;黄雅芳;高毅;邱月芳;王伯华;常才;;甲状腺癌声像图特征及漏误诊分析[A];中华医学会第十次全国超声医学学术会议论文汇编[C];2009年
8 郭文佳;程文;荆慧;;16例甲状腺弥漫硬化型乳头状癌的超声表现[A];中华医学会第十次全国超声医学学术会议论文汇编[C];2009年
9 郭文佳;程文;荆慧;;16例甲状腺弥漫硬化型乳头状癌的超声表现[A];庆祝中国超声诊断50年暨第十届全国超声医学学术会议论文汇编[C];2008年
10 魏丽晶;丁勇;宋人和;龙亚红;;~(18)F-FDG PET/CT在甲状腺癌术后的应用[A];中华医学会第九次全国核医学学术会议论文摘要汇编[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 夏米西努尔·伊力克;基于新疆甲状腺癌人群的肿瘤分子标记物研究[D];新疆医科大学;2011年
2 张矛;REGγ基因沉默对甲状腺癌生长、周期及凋亡的影响[D];重庆医科大学;2008年
3 曹仁贤;S100A13基因在甲状腺癌中的表达及相关作用研究[D];南华大学;2010年
4 付言涛;泰索帝作用于甲状腺未分化癌细胞系的蛋白质组学研究[D];吉林大学;2008年
5 郑冬梅;甲状腺结节术后患者的回顾性分析[D];山东大学;2009年
6 卢秀波;血清蛋白质指纹图谱在甲状腺癌诊断的临床应用研究[D];郑州大学;2007年
7 张海燕;survivin与VEGF在甲状腺癌中的表达及干预性实验研究[D];中国医科大学;2006年
8 楼征;国人家族性腺瘤性息肉病分子遗传学研究及家系监测和治疗策略[D];第二军医大学;2006年
9 易艳玲;临床核医学诊疗中的辐射剂量与防护研究[D];复旦大学;2012年
10 王澎;hTERT启动子调控hNIS和hTPO基因联合转染胶质瘤细胞介导放射性碘治疗的研究[D];天津医科大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 黄志莹;甲状腺癌168例外科临床治疗分析[D];大连医科大学;2010年
2 陈景新;甲状腺癌同期双侧颈清术112例临床分析[D];广西医科大学;2010年
3 张鹏;结节性甲状腺肿与甲状腺癌并存的诊断与治疗回顾性分析[D];河北医科大学;2011年
4 闫志华;~(131)Ⅰ联合碳酸锂去除甲状腺癌术后残余组织的临床研究[D];郑州大学;2010年
5 曹衡玉;超声探查甲状腺癌主要供血动脉的血流动力学研究[D];广西医科大学;2010年
6 胡海燕;青岛地区乳腺、甲状腺多原发癌患者乳腺癌组织、甲状腺癌组织中RETmRNA的表达[D];青岛大学;2010年
7 邱晶晶;甲状腺癌术后血清钙的动态观察[D];吉林大学;2011年
8 韩颖;甘露糖结合凝集素对甲状腺癌细胞增殖、凋亡及相关蛋白表达影响的研究[D];河北医科大学;2011年
9 刘义粉;桥本病63例外科诊疗体会[D];河北医科大学;2010年
10 侯信明;CT扫描在甲状腺癌术前诊断及病情评估中的应用[D];吉林大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 重庆 杨娅君;年轻女性警惕甲状腺癌[N];家庭医生报;2009年
2 记者 李立志 通讯员 张小玲;甲状腺癌术后要终生服药[N];广州日报;2004年
3 河北省秦皇岛市肿瘤医院放疗科 赵成会;20~40岁女性易得甲状腺癌[N];健康时报;2008年
4 天津医科大学附属肿瘤医院副院长 高明 李运红 胡颜 整理;甲状腺癌重女轻男[N];健康报;2009年
5 本报记者 王雪敏;治疗甲状腺癌须个体化[N];医药经济报;2010年
6 天津医科大学附属肿瘤医院 高明 魏松峰 于洋;辐射可致甲状腺癌 青少年更易受影响[N];健康报;2011年
7 上海市中医医院肿瘤科副主任医师 刘静;中医治疗甲状腺癌[N];解放日报;2011年
8 本报记者 王雪敏;甲状腺癌临床路径,如何看[N];医药经济报;2011年
9 ;甲状腺癌疗法可能增加乳腺癌危险[N];医药经济报;2001年
10 张中桥;甲状腺癌与IL-8的表达有关[N];中国医药报;2000年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978