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库尔勒香梨化学成分及粗多糖生物活性初步研究

乌英  
【摘要】:目的:1.对新疆库尔勒香梨乙酸乙酯和正丁醇萃取物中的化学成分进行研究。2.确定库尔勒香梨果肉和果皮中总黄酮和总多糖的最佳提取工艺,并对含量进行测定;3.对库尔勒香梨粗多糖进行抗氧化作用研究。4.初步探讨库尔勒香梨粗多糖的镇咳,祛痰,免疫调节作用。方法:1.溶剂重结晶法联合硅胶柱、葡聚糖凝胶柱色谱,提取分离乙酸乙酯和饱和正丁醇部位中的化学成分,借助核磁共振波谱法(NMR)进一步分析鉴定其化学成分结构。2.在单因素实验基础下,采用L9(34)正交实验方案安排实验,采用紫外分光光度法测定总黄酮和总多糖含量,确定最佳提取工艺。3.采用紫外分光光度法技术,评价库尔勒香梨粗多糖对DPPH、羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(·O2-)、ABTS+的清除及铁离子还原能力的强弱。4.通过浓氨水、二氧化硫刺激法、气管酚红排泄法、环磷酰胺致小鼠免疫抑制模型的建立等实验,观察粗多糖的镇咳、祛痰作用;以血清白介素-2、干扰素-γ、巨噬细胞吞噬指数等为观察指标,探讨其粗多糖免疫调节作用。结果:1.分离得到化合物6种,其中乙酸乙酯洗脱部位分离得到化合物Ⅰ齐墩果酸,化合物Ⅱ熊果苷,化合物Ⅲβ-谷甾醇,化合物Ⅳ槲皮素,饱和正丁醇层分离得到化合物Ⅴ齐墩果酸甲酯,化合物Ⅵ熊果酸。2.①确定了香梨果肉中总黄酮的最佳提取条件为:乙醇浓度50%,提取时间120min,提取温度40℃,提取次数为1次;果皮中总黄酮的最佳提取条件为:乙醇浓度85%,提取时间60min,提取温度40℃,提取次数为2次。果肉和果皮中总黄酮得率为1.79mg/g、5.12mg/g。②确定了库尔勒香梨果肉总多糖最佳提取条件为:料液比1:40,提取时间60min,提取温度60℃,提取次数为1次;果肉中总多糖得率为78.29mg/g。3.库尔勒香梨粗多糖对DPPH自由基(DPPH·),羟基自由基(·OH),超氧自由基(O2-), ABTS+有着良好的清除能力,还能有效地还原铁离子,说明库尔勒香梨粗多糖具有良好的抗氧化活性。4.香梨粗多糖可以延长咳嗽潜伏期,减少咳嗽次数,并可以增加排痰量;香梨粗多糖高、中、低给药量组具有增加小鼠血清IL-2、IFN-γ含量,增加免疫器官的脾和胸腺的重量,提高巨噬细胞吞噬能力等免疫调节作用。结论:1.综上所述,从库尔勒香梨中得到6种化合物。2.正交实验提取工艺实验结果表明此方法操作简便,结果稳定,适用于总多糖和总黄酮的测定。3.库尔勒香梨粗多糖具有良好的抗氧化活性,并可促进免疫抑制小鼠的白介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)的分泌,提高脏器指数、吞噬指数等免疫因子,说明了库尔勒香梨粗多糖有一定的免疫增强及镇咳祛痰的作用,为进一步研究库尔勒香梨药理作用奠定了基础。


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