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基于内皮型一氧化氮合酶脱偶联的木兰脂素对高血压大鼠降血压作用及分子机制

阿勒腾图娅  
【摘要】:目的:1探讨木兰脂素(Magnolin,Mag)对原发性高血压大鼠和继发性高血压大鼠血压的影响。2探讨木兰脂素对原发性高血压大鼠(SHR)胸主动脉eNOS脱偶联的改善作用;进而揭示木兰脂素抗eNOS脱偶联的作用机制。方法:1肾性高血压大鼠造模方法:清洁级SD大鼠32只,随机分成丝线组和银夹组,丝线组采“0”号手术缝合线和针灸针;银夹组采直径0.2 mm银夹建立肾性高血压模型,模型建成后,再随机分成模型组、卡托普利组(40 mg/kg)、木兰脂素高(80 mg/kg)、中(40 mg/kg)、低剂量(20 mg/kg)组。连续灌胃给药7 d。2原发性高血压大鼠(SHR),适应性喂养一周,随机分为6组:WKY对照组、SHR对照组、CAP组(40mg/kg)、Mag高剂量组、Mag中剂量组、Mag低剂量组。Mag高、中、低剂量组给药剂量分别为100mg/kg、20mg/kg、4mg/kg;给药前后监测大鼠的摄食量和饮水量和用尾套法测定大鼠的血压,每次测量三次取均值,灌胃时间为期7d,监测大鼠给药后摄食量、饮水量和血压三项指标,同步记录结果并对药物干预前后各项指标的数据进行统计分析。3将灌胃一周后的大鼠处死,收集心、胸主动脉两种组织进行冻存处理;取各组大鼠的胸主动脉,利用离体血管条检测系统检测SHR经木兰脂素干预后,胸主动脉舒张功能的变化情况。4用Western Blot的方法评估木兰脂素干预对SHR大鼠胸主动脉eNOS蛋白亚基脱偶联的水平。5用Real-time PCR和Western blot方法测定NADPH氧化酶亚基(gp91phox、p22phox)蛋白质和mRNA含量的变化,考察在基因和蛋白质表达水平上木兰脂素干预对NADPH氧化酶亚基的影响。6用比色法测量SHR模型组和SHR木兰脂素处理组的胸主动脉丙二醛(MDA)的含量,考察木兰脂素干预对氧化水平的影响。结果:1丝线组和银夹组大鼠的血压逐渐升高,术后9周,两组血压均升高差异显著且保持稳定,但两组间的差异无统计学意义。药物干预7 d后,与模型组比较,卡托普利组和木兰脂素组血压明显降低,其差异具统计学意义(P0.05),但木兰脂素各剂量组之间血压差异无统计学意义。2SHR大鼠药物干预7 d后,卡托普利组和木兰脂素高剂量组与SHR组相比,收缩压明显下降,其差异具有统计学意义。与SHR组相比,木兰脂素中、低剂量组的收缩压降低,但差异不明显,不具有统计学意义。比较各组动物的舒张压发现,卡托普利组和木兰脂素处理组的舒张压明显降低,其间的差异具有统计学意义,但是木兰脂素各组之间与卡托普利之间的的差异不明显,不具有统计学意义,木兰脂素具有明显的降低血压的作用。3木兰脂素对硝普钠(SNP)和乙酰胆碱(Ach)对SHR大鼠血管舒张的影响,与SHR组相比,木兰脂素处理组SNP血管舒张曲线没有明显右移,说明各组的血管平滑肌没有明显区别,木兰脂素对平滑肌依赖的血管舒张作用没有影响;木兰脂素处理组Ach血管舒张曲线明显右移。4根据Western blot的结果所示,木兰脂素明显抑制gp91-phox蛋白表达,而对p22-phox蛋白表达抑制作用不显著。结论:木兰脂素可以降低原发性高血压大鼠和肾性高血压大鼠舒张压和收缩压,对原发性高血压和继发性高血压均具有一定的降压作用。其作用机制可能与木兰脂素抑制gp91-phox蛋白表达,减少氧化应激,进而抑制eNOS脱偶联,保护血管内皮有关。


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