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聚乳酸-羟基乙酸共聚物田蓟苷微球的研究

贾琦琦  
【摘要】:目的:(1)初步研究田蓟苷(TIL)体外抗肺纤维化作用。(2)建立TIL的HPLC含量测定方法。(3)采用SPG膜乳化法制备聚乳酸-羟基乙酸共聚物田蓟苷微球(TIL-PLGA-MS)。(4)对TIL-PLGA-MS进行形态考察及表征。(5)TIL-PLGA-MS体外释药初步研究。方法:(1)初步考察不同浓度TIL对人胚肺成纤维细胞(HFL-1)的影响。(2)建立了田蓟苷HPLC含量测定方法,并进行方法学考察。(3)采用SPG膜乳化法制备了田蓟苷微球。在单因素实验的基础上,以转速、聚乙烯醇用量、PLGA用量为考察因素,以粒径、球径指标和微球不黏连程度为响应值,采用星点设计-效应面法对其制备工艺进行了优化。(4)电子显微镜、扫描电镜(SEM)对微球的粒径、表面形态进行考察,采用差示扫描量热法(DSC)、X-射线衍射(XRD)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)对TIL-PLGA-MS微球载药情况进行研究。(5)考察TIL-PLGA-MS不同时间点的体外释药情况。结果:(1)当田蓟苷浓度大于30.45ug/ml时,对HFL-1细胞增殖的抑制率大于50%,并呈剂量依赖性抑制HFL-1细胞增殖。(2)田蓟苷在5.16~206.4μg·m L~(-1)浓度范围内与峰面积线性关系良好,含量测定方法学精密度良好,重复性和回收率符合要求。(3)TIL-PLGA-MS的最佳制备工艺为:精密称取田蓟苷0.08 mg,PLGA 80 mg,加二氯甲烷4 m L超声溶解作为有机相,量取浓度为0.83%的PVA 75 m L作为水相,将有机相加入SPG膜乳化仪的压力釜中,在0.005 mpa压力下于920 r/min速度下,分散到0.83%PVA溶液中,在40℃时,搅拌3 h;离心分离载药微球,并用蒸馏水洗涤3次后,将微球转移至冻干皿中,加5%甘露醇作为冻干保护剂,-80℃预冻12 h后转移至冷冻干燥机冷冻干燥12 h,制得TIL-PLGA-MS。(4)所制备的TIL-PLGA-MS外观呈球形或类球形,大小相近,分散均匀,平均粒径为(8.22±0.34)μm。红外光谱结果表明TIL-PLGA-MS中田蓟苷可能通过聚合与PLGA形成载药微球;X-射线衍射分析结果表明微球中TIL及其PLGA均为无定形,田蓟苷与PLGA之间并不仅仅是包合作用。DSC曲线结果表明微球中田蓟苷与PLGA之间可能存在相互作用力。(5)体外释药研究表明,原料药于6 h左右基本释药完毕,而TIL-PLGA-MS在6~10 h之间仍有释药。结论:(1)田蓟苷可以抑制人胚肺成纤维细胞的增殖。(2)田蓟苷含量测定方法准确可行。(3)优选出的田蓟苷微球制备工艺方法简便、稳定。(4)制得的田蓟苷微球表面圆整光滑,粒径符合要求,可以达到被动靶向的要求,DSC、XRD、FT-IR结果表明,微球中包载目标药物田蓟苷。(5)体外释药结果初步表明,田蓟苷微球具有缓释效果。


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