IL-4、β_2-AR基因多态性及ECP、IgE与维吾尔族支气管哮喘的关系

【摘要】：支气管哮喘(哮喘)为Ⅰ型超敏性疾病，具有明显的个体差异，一般只有少数过敏体质的人才会发生。过敏体质与特应性(atopy)相关，亦与遗传有密切关系，有明显的家族聚集性，50％特应性患者的子代都患有特应性疾病，但所表现的症状即使在同一家族中也可不同。随着分子生物学与分子免疫学研究的不断深入，对参与哮喘在内的Ⅰ型超敏反应的IgE抗体、各种炎症细胞以及血小板活化因子(PAF)为代表的化学递质或细胞因子有了更新的理解。许多研究结果提示，哮喘除与上述因素以及自律神经异常、环境因素等有关外，遗传因素在其发病中起着举足轻重的作用。目前公认哮喘是一种具有多基因遗传倾向的疾病。我们在详细询问病史并进行肺功能检查的同时检测了新疆和田地区212例维吾尔族人群血样中的S-ECP、血清总IgE和吸入性变应原的特异性IgE抗体(Phadiatop)水平，以探讨新疆维吾尔族人群血清总IgE、特异性IgE及ECP与支气管哮喘发病的关系。同时，应用多聚酶链式反应—限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)及等位基因特异性PCR(ASP)等现代分子生物学方法，对目前已知的可能涉及哮喘发病的β_2-AR16和27位点基因多态性、IL-4启动子区-589(C/T)位点基因多态性进行检测及其与总IgE的关系进行分析，旨在了解β_2-AR和IL-4二者的基因多态性与新疆维吾尔族人群哮喘的关联情况，从分子水平探索遗传因素在新疆维吾尔族人群哮喘发病中的作用。 一、血清总IgE、特异性IgE及ECP水平与维吾尔族人群支气 管哮喘的关系 研究苔景和目的 哮喘是由多种炎症细胞及细胞因子（CKS）共同参与而形成的气 道慢性变态反应性炎症。而嗜酸细胞己被公认是变态反应性疾病的标 志。在变态反应和慢性炎症中起着重要作用。嗜酸细胞亦有免疫调节 功能，在几个方面修饰T、B淋巴细胞、肥大细胞和中性粒细胞等的 活性。此外，它在组织修复、重建和抗原的表达中亦起着重要作用。 在嗜酸细胞释放的颗粒蛋白中，嗜酸细胞阳离于蛋白（ECP）和主要 碱性蛋白（MBP）的毒性作用最强，而其中以ECP 更加明显，ECP 被普遍认为是炎性反应标志，反映了嗜酸细胞的活化程度。测定病人 血清、痰液及支气管肺泡灌洗液（BALF）中的ECP水平，可以判定 哮喘炎症的严重程度及预后，预测疾病的发作，直接监测和指导抗炎 治疗。为此，我们在详细询问病史并进行肺功能检查的同时检测了新 疆和田地区维吾尔族人群血样中的 S干CP、血情总屹E和吸入性变应 原的特异性lgE抗体ohadiatop）水平，以探讨新疆维吾尔族人群血 清总IgE、特异性IgE及ECP与支气管哮喘发病的关系。 方法 作者于 2002年 3月在新疆和田地区共调查了 ZIZ例 18～72岁维 吾尔族人（哮喘患者123例，正常对照89例），详细询问病史，采集 血样并进行肺功能检查。根据临床特点、肺功能（FEVl占预计值％） 和所需药物情况将患者分为间歇发作门 例）、轻度门 例）、中度（3 例）、重度门 例）四个组，平均年龄38．35士9I7 岁。健康成年人 89名，平均年龄3 8．12土8．23岁（18－71岁卜作为正常对照组。均采用 真空S盯管采集和处理血清。血清肛P、皿清总lgE和吸入性变应原 的特异性IgE抗体卯hadiatop）水平测定（血样）均在新疆医科大学 变态反应检验中心（新疆医科大学第一附属医院耳鼻喉科）由固定资深 专业测试人员进行测定，应用Un汇AP 00全自动体外变应原检测系 统（SWEDEN PHARMACIA Un汇AP SystemS）检测，操作按说明进行， 定量测定血清ECP、血清总IgE，同时对吸入性变应原的特异性IgE — —2一 抗体（PhadiatoP）水平进行定性测定。测定所用试剂均由瑞典法玛西 亚公司（PHARMACIA UniCAP，SWEDEN）提供。 结果 S正CP与哮喘的症状评分k SCOreX总 IgE和肺功能厌EVI 和PEF）高度相关仪＜0乃1卜在哮喘各组之间，SECP都有显著性差异 （均有 P＜0．01卜 最高值出现在重度哮喘患者组（EC叫．ZIfl。12 11 g／LX且血清 ECP水平与病情严重程度呈正相关关系O－0石3，P＜0刀1＼ 同时还发现，变态反应的出现也与SICP值增高有关，IgE与SICP 呈高度正相关关系…－o61，P＜0．01X｝＊CP值也都与哮喘发作的自觉 症状和通过检查所得的客观体征具有高度相关性，ECP与PEF之间存 在负相关关系O—0．67，P＜0刀5卜 以上结果表明，SICP和 lgE二者及 其相互关系主要取决于嗜酸粒细胞激活程度和分泌蛋白的能力，它们 能反映哮喘气道炎症的活动情况，并可预示哮喘发作的严重程度。 二、pZ－肾上腺素能受体基因多态性与新瞩锥吾尔族人群支气管 哮喘及其临床表型的关系 研究背景和目的 pZ肾上腺素能受体（pZ－AR）基因与哮喘的关系一直受到广泛 的重视。编码人02叭x的基困定位于染色体sq“”卫区，己有几个多态 性位点被发现，其中编码区第16和27位氨基酸的变异已在体外实验 中被证实其可以改变BZ人R的功能，是近年来国际上研究哮喘易感性 及疾病调节基因的重要候选基因之一。我们以新?