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免疫损伤性和胆汁性肝纤维化动物模型的制备

陈伦牮  
【摘要】: 目的:为了研究肝纤维化疾病的发病机理、病理生理变化和防治方法,需要理想的动物模型,本实验用胆总管结扎和猪血清腹腔注射法,分别建立两组大鼠肝纤维化模型,试图比较出两种方法各自的特点。方法:本实验用体重100-150克的雄性Wistar大鼠200只,采用胆总管双重结扎复制大鼠肝纤维化模型,猪血清腹腔注射3次/周,1ml/次,持续注射8周,建立大鼠肝纤维化模型,在4个时间段(14天,28天,42天,84天)观察下列指标:1.体重变化;2.肝脾重量改变;3.光镜、电镜下病理学改变;4.肝脏肥大细胞计数;5.肝组织羟脯氨酸浓度的变化。结果:1.胆总管结扎组体重比猪血清组和对照组减轻(P<0.01),猪血清组与对照组间差异没有统计学意义;2.14天时,胆总管结扎组的肝脏重量较猪血清组重,28天时实验组脾脏重量均较对照组增加(P<0.01)猪血清组与对照组间差异无统计学意义。3.14天时,两实验组均出现肝纤维化,(P<0.05)成模率均为100%,均无死亡,42天时,猪血清组形成肝硬化的典型特征,无死亡,28天时胆总管结扎组即形成肝硬化的典型特征,死亡率60%(42天时);4.14,28天时,胆总管结扎组肝脏的肥大细胞计数较猪血清组增多(P<0.05),猪血清组的肝脏内肥大细胞,随制模时间延长,逐渐增多(P<0.05)。5.在14天时两实验组的肝组织羟脯氨酸浓度均高于对照组(P<0.01),但两实验组间差异无统计学意义(P>0.05),42天时胆总管结扎组,羟脯氨酸浓度高于猪血清组(P<0.05)。结论:1.腹腔注射猪血清和胆总管结扎均可制备出较为理想的大鼠肝纤维化肝硬化模型。2.腹腔注射猪血清制备肝纤维化肝硬化模型有利于原位观察 和分析,对肝移植的实验室研究及其它慢性肝炎等所致肝纤维化肝硬 化的诊断、防治研究,具有较大应用意义。3.胆总管结扎所制肝纤维 化肝硬化模型更适合梗阻性黄疽及肝硬化等疾病的研究。4.Masson三 色染色可以作为肝纤维化肝硬化组织细胞观察的一种重要方法:肝纤 维化过程中,肥大细胞数量的动态变化,可以作为观察肝纤维化变化 的一项辅助指标;肝脏羟脯氨酸的浓度变化可以作为肝纤维化的辅助 诊断及应用于相关实验的研究。


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