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TNF-α和IL-1βmRNA在大鼠肝缺血/再灌注损伤时肺组织中的表达

唐菲  
【摘要】:目的 观察大鼠肝脏缺血/再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,IRI)过程中肝脏和肺组织TNF-α、IL-1βRNA的表达;肝脏相关酶活性的改变以及肝脏和肺结构的变化;探讨肝脏缺血/再灌注过程对肺的影响以及这种影响可能的机制。 材料和方法 选择健康的雄性wistar大鼠48只,建立肝脏缺血/再灌注动物模型。每组8只,共分6组:对照组(假手术组,CTL)、缺血30min组(I组)、缺血30min再灌注组(I/R组)、缺血30min再灌注1h组(I/R1h组)、缺血30min再灌注2h(I/R2h组)、缺血30min再灌注4h组(I/R4h组)。应用免疫组织化学方法和原位杂交方法测定肝脏和肺组织中TNF-α、IL-1β-mRNA的表达。左心室取血测定血肝脏酶,同时观察肝脏和肺组织形态变化。 结果 实验发现在肝脏缺血/再灌注过程中,TNF-α在肝脏中的表达在I/R组就有明显升高(P0.05),在I/R1h几乎达到高峰,I/R2h至I/R4h虽然略有波动,但与其前组比较无显著性差异(P0.05);IL-1β-mRNA在肝脏中自I组起表达就明显增多(P0.01)。TNF-α在肺组织中的表达是在I/R组就有明显升高(P0.05),但自I/R2h后无明显变化(P0.05);IL-1β-mRNA在肺组织中的表达在I/R组就有明显升高(P0.01)。血AKP、GPT、γ-GT明显较对照组升高(P0.01,P0.05)。肝脏HE染色见有单核巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞浸润,细胞肿胀,空泡变性,甚至出现局灶性坏死。肺HE染色见肺毛细血管充血,间质增宽,有炎性细胞浸润,在I/R4h组甚至出现肺 新疆医科大学硕士研究生学位论文 泡腔代偿性扩张,部分为融合性气肿。 结论肝脏缺血/再灌注过程中,肝脏的结构和功能都有较严重的损 害:肺的结构也出现了明显改变,符合急性肺损伤的形态结构变化。 肝脏和肺组织中都有TNF一Q和工L一lp一mRNA的表达,这种表达在缺血 /再灌注早期就出现。TNF一a和工L一lp一mRNA参与了急性肺损伤的发 生。 关键词缺血/再灌注损伤;TNF一。;工L一l日;肝脏:肺 月IJ吕 良好的血液循环是组织细胞获得充足的氧和营养物质供应并排 除代谢产物的基本保证,各种原因造成的组织血液灌注减少可以使细 胞发生缺血性损伤(ischemia injury),尽早恢复血液灌注是减轻缺 血性损伤的根本措施。随着医学水平的不断提高,各种溶栓疗法、动 脉搭桥术、冠脉血管成形术、体外循环术得以推广和应用,特别是器 宫移植术的开展,无疑是医学科学技术的重大进展,对解决临床上的 缺血性疾病具有划时代的意义,但在一些情况下发生了器官缺血/再 灌注损伤,这引起了医学界的广泛的关注。大量的动物实验和临床观 察证明在恢复血液再灌注后,部分动物或患者细胞功能代谢障碍及结 构破坏反而加重,因而将这种血液再灌注后缺血性损伤进一步加重的 现象称为缺血/再灌注损伤(isehemia一reperfusion ioj。ry,丁尺I)。 关于缺血/再灌注损伤的发生机制有以下几个方面:1.自由基的作用: 自由基具有极为活泼的反应性,可经其中间代谢产物不断扩展生成新 的自由基,形成连锁反应。自由基可使膜脂质过氧化,抑制蛋白质的 功能,破坏核酸和染色体。2.钙超载:引起线粒体功能障碍,使ATP 生成减少;激活磷脂酶,促进膜磷脂分解,使细胞质膜受损;导致缺 血一再灌注性心律失常;促进氧自由基生成;使肌原纤维过度收缩。 3.微血管的损伤和白细胞的作用:微血管通透性增高,口径变小,使 血液流变学发生改变,甚至出现无复流现象(no一refl。w phen。I’nen。n)。 自由基损伤和中性粒细胞粘附、内皮细胞肿胀是微血管损伤的主要原


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