收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

人类8型疱疹病毒组合抗原血清检测方法的建立及新疆地区流行病学调查

何方平  
【摘要】:目的:构建人类8型疱疹病毒(HHV-8)基因ORF_(73CC),ORF_(65),ORF_(K8.1)重组原核表达质粒并诱导表达,获得HHV-8病毒潜伏态相关核抗原、包膜蛋白、外壳蛋白的重组融合蛋白,以这三种病毒重组融合蛋白作为检测抗原,建立人类8型疱疹病毒组合抗原酶联免疫吸附检测法(组合抗原ELISA),对新疆地区人类8型疱疹病毒流行状况做初步的血清流行病学调查并分析感染危险因素。方法:1)软件设计引物,在引物两端添加特异性酶切位点,以pGEM-Teasy/ORF_(73CC)、pGEM-Teasy/ORF_(65)、pGEM-Teasy/K8.1质粒为模板,PCR扩增各基因序列,克隆入原核表达载体pET-41a(+)中,构建原核表达质粒pET41a-ORF_(73CC)、pET41a-ORF_(65)、pET41a-K8.1;转化E.coli DH_(5x),经酶切、测序鉴定其插入序列的正确性,转入E.coliBL_(21)(DE3),并诱导表达,以亲合层析柱纯化,SDS-PAGE、Western-Blot方法进行表达蛋白的分析和免疫特异性鉴定;以重组融合蛋白为抗原,分别以卡波西肉瘤患者血清和健康儿童血清作为阳性对照和阴性对照,建立人类8型疱疹病毒组合抗原酶联免疫吸附检测法(组合抗原ELISA),采用卡波西肉瘤患者血清和来自低HHV-8感染地区的法国肝移植后皮肤肿瘤患者血清验证检测方法的灵敏性、特异性。2)对新疆医科大学第一附属医院和肿瘤医院住院的维吾尔族和汉族肿瘤患者进行了随机问卷调查、病历记录及采


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 纪玉莲 ,彭炎强 ,魏小梅 ,李广然 ,李志坚;肾移植术后卡波西肉瘤的临床特征和防治——附1例报告[J];新医学;2003年12期
2 膝茂芳;左乳肿物针吸细胞学诊断卡波西肉瘤一例[J];中华肿瘤杂志;1995年05期
3 刘德纯;卡波西肉瘤研究进展[J];蚌埠医学院学报;1996年03期
4 毓勤;;卡波西肉瘤的新疗法[J];国外医学情报;2000年06期
5 何洁;;1例高龄卡波西肉瘤患者放疗的护理[J];护理实践与研究;2008年15期
6 周曾全,王玲,杨欣平,王玉,李江嵘,曹韵贞;AIDS并发皮肤、肺卡波西肉瘤一例[J];诊断学理论与实践;2004年01期
7 金华!100700,皋岚湘!100700;淋巴结病型卡波西肉瘤一例[J];中华病理学杂志;2000年04期
8 陈韦任;曹剑;英明中;李小鹰;李向红;;高龄老年心血管病患者合并卡波西肉瘤一例[J];中华老年心脑血管病杂志;2006年01期
9 卢斯汉;岑玉文;易俊卿;;艾滋病相关型卡波西肉瘤1例[J];岭南皮肤性病科杂志;2009年01期
10 张锡宝;卡波西肉瘤与HHV-8[J];岭南皮肤性病科杂志;2001年02期
11 胡东艳;王岫南;李明;;艾滋病相关型卡波西肉瘤[J];临床皮肤科杂志;2006年09期
12 周新刚;刀文斌;张亮;郎振为;;全身播散性艾滋病相关型卡波西肉瘤一例[J];中国艾滋病性病;2010年06期
13 康晓静;石得仁;;卡波西肉瘤[J];临床皮肤科杂志;2006年11期
14 刘德纯,林清森;艾滋病消化道病变的病理学研究(附54例尸检材料)[J];蚌埠医学院学报;1995年06期
15 蔺波;蔡蕊;;9例卡波西肉瘤病人放射治疗的护理[J];护理研究;2010年14期
16 薛文昌;;接受肾移植后出现卡波西肉瘤[J];皮肤病与性病;1991年03期
17 李大任;张振宇;赵明强;;卡波西形血管内皮瘤1例[J];中国现代医生;2007年20期
18 楼婷;李江华;孟冰;;高龄老年糖尿病患者合并卡波西肉瘤1例[J];西北国防医学杂志;2009年03期
19 梁飞立;陆新岸;宋开星;何艳英;;肺部艾滋病相关性卡波西肉瘤1例并文献复习[J];中国社区医师(医学专业);2011年17期
20 张永萍;赵琴;仲英娜;;HIV/AIDS相关型卡波西肉瘤1例[J];临床皮肤科杂志;2008年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李玉叶;何黎;;艾滋病相关卡波西肉瘤[A];2009全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2009年
2 李佩;岑玉文;符林春;;中西医结合治疗艾滋病合并卡波西肉瘤1例[A];全国第2届中西医结合传染病学术会议暨国家中医药管理局第1届传染病协作组会议论文汇编[C];2008年
3 李佩;符林春;岑玉文;;中西医结合治疗艾滋病合并卡波西肉瘤1例[A];中华中医药学会防治艾滋病分会第六届学术年会论文汇编[C];2008年
4 韩黎;宋江美;;1例艾滋病患者合并卡波西肉瘤双足大面积坏死的护理[A];全国医院感染护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2005年
5 杨杰;饶贤才;王冬梅;胡珍;原薇薇;陈志瑾;;抗MRSA嵌合药靶TG-TPase的设计与构建[A];重庆微生物学会第九届会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2009年
6 姜文博;单安山;孙进华;;鸡白细胞介素18基因的克隆及表达[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十次学术研讨会论文集[C];2008年
7 孙进华;单安山;姜文博;;鸡γ-干扰素基因的克隆及表达[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十次学术研讨会论文集[C];2008年
8 李昕;李尧华;于顺;陈彪;;大鼠α-突触核蛋白cDNA克隆、原核表达及重组蛋白纯化[A];中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会论文摘要汇编[C];2005年
9 谢金文;沈志强;王金良;任艳玲;管宇;苗立中;;猪细小病毒(PPV)SD1株NS1基因的克隆与原核表达[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集(上册)[C];2009年
10 王鹏飞;朱冠保;张丽芳;;CEA多表位疫苗的新型设计及其重组原核表达载体的构建[A];2009年浙江省外科学学术年会论文汇编[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 何方平;人类8型疱疹病毒组合抗原血清检测方法的建立及新疆地区流行病学调查[D];新疆医科大学;2006年
2 朱德康;鸭疫里默氏杆菌荚膜多糖输出蛋白基因的发现及其免疫原性研究[D];四川农业大学;2006年
3 杨慧;鳗弧菌金属蛋白酶基因在大肠杆菌中的表达、纯化、定点突变及其DNA疫苗的研制[D];中国海洋大学;2007年
4 王桂荣;奶牛子宫内膜抗菌肽分离纯化、BNBD5基因的克隆及原核表达[D];甘肃农业大学;2009年
5 秦宇;干扰素调节因子7对人类8型疱疹病毒基因表达的影响[D];天津医科大学;2009年
6 张灿;荷斯坦奶牛细胞因子基因的克隆、表达及重组蛋白的应用[D];中国农业大学;2005年
7 徐贤坤;水牛γ-干扰素单克隆抗体制备及水牛结核病夹心ELISA检测方法的初步建立[D];四川农业大学;2009年
8 王星;新疆人类8型疱疹病毒的致病机制研究及在献血者中流行病学调查[D];新疆医科大学;2009年
9 黄河;Flt3配体基因的克隆、表达及生物学活性鉴定[D];吉林大学;2006年
10 贾仁勇;鸭瘟病毒蛋白质组二维电泳特性和UL24基因的发现、原核表达及应用研究[D];四川农业大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 方忠意;H5亚型禽流感病毒核蛋白主要抗原域的表达及重组蛋白ELISA方法的建立[D];河南农业大学;2006年
2 刘瑞峰;猪瘟病毒囊膜糖蛋白E2的表达研究及其单克隆抗体的制备[D];华中农业大学;2008年
3 刘洪;猪Ghrelin基因的克隆、原核表达及Ghrelin蛋白多克隆抗体的制备研究[D];华中农业大学;2008年
4 张弟;重组FHL2的原核表达、纯化及抗血清的制备[D];南方医科大学;2008年
5 戴晓莉;人HLX基因克隆表达及其功能的初步研究[D];江苏大学;2009年
6 孙其喆;牛双芽巴贝斯虫HSP20基因的克隆表达及其重组蛋白的免疫反应性研究[D];新疆农业大学;2009年
7 Khadidja CHENTOUF;人重组VEGF蛋白、多克隆抗体的制备及在肿瘤检测方面的初步研究[D];东北师范大学;2009年
8 陈麟凤;重组人可溶性BAFF及其突变体的制备与活性分析[D];第三军医大学;2005年
9 张春桃;三种截短的泡球蚴Em18基因原核表达质粒的构建、表达及初步鉴定[D];新疆医科大学;2006年
10 张小燕;鸡CD3和IL-2分子单克隆抗体的研制与鉴定[D];扬州大学;2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 李文;病毒致癌机制研究最新进展[N];中国医药报;2008年
2 吴帅;歧视艾滋,伤了自己[N];新华每日电讯;2011年
3 吴丹丹;艾滋病的发现和起源[N];大众科技报;2006年
4 艾丽丝;抗击艾滋,从了解开始[N];中国国门时报;2006年
5 宋仲玉 刘玉琴 王晓辉;健康生活 科学防癌[N];甘肃日报;2006年
6 王建璋;癌症的外因和内因(上)[N];保健时报;2004年
7 周颖;中医药治疗艾滋病科学有效[N];中国中医药报;2007年
8 王丹;艾滋病的分期与表现[N];农村医药报(汉);2007年
9 杨虚杰;敏锐的科学洞察力从哪里来[N];中华读书报;2009年
10 岳阳;原发性渗出性淋巴瘤的治疗研究取得进展[N];中国医药报;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978