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TGF-β1、TβR及Smad2/3在泡球蚴感染小鼠肝脏中的动态变化

李瑶  
【摘要】: 目的:动态观察泡球蚴(Em)感染Balb/c小鼠肝脏中转化生长因子β1 (TGF-β1)、TGF-β1受体(TβRⅠ、TβRⅡ)和Smad2/3在Em致肝损伤过程中的表达,分析其与肝组织病理改变和纤维化程度的关系,揭示其在泡型包虫病发生中的作用与机制。方法:将Balb/c小鼠随机分为泡状棘球蚴感染组和正常对照组,分别于造模后动态取肝组织。分别采用RT-PCR、Western blot和免疫组织化学技术检测TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA水平及其在肝内的表达及定位;HE和Masson染色观察肝组织病理改变和纤维化程度。结果:1)泡球蚴感染小鼠8周可见明显泡球蚴囊泡,24周泡球蚴病灶遍布肝脏各叶;2)RT-PCR显示感染8周后TGF-β1 mRNA实验组高于对照组。各时段Smad2 mRNA水平比正常组高,感染8天达最高,其后逐渐下降。Smad3 mRNA24周时有显著差异;3)Western blot显示感染4周后,TGF-β1蛋白表达水平逐渐增加,以12周表达最高,24周后逐渐下降。感染8天后Smad2/3蛋白开始升高,4周后达高峰;4)免疫组织化学显示TGF-β1、TβRⅠ、TβRⅡ、Smad2/3主要表达部位是肝窦区、胞浆、胞膜及病灶处的生发层周围,感染12周TGF-β1表达最高。TβRⅠ感染8天后上调,8周时达峰值。TβRⅡ感染4周后开始上调,24周时达到峰值。感染8天后Smad2/3升高,8周达最高;5)病理学观察感染时肝汇管周围有炎细胞浸润和肝纤维化逐渐加重。结论:随着Em感染时间的延长TGF-β1、TβR、Smad2/3的表达逐渐增高,参与了Em感染Balb/c小鼠致肝纤维化及肝损伤过程。TGF-β1可能通过TGF-β/Smads信号通路在Em感染中发挥其调控作用。


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