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巨型艾美耳球虫(Eimeria Maxima)免疫原性差异株的筛选及其抗原比较分析

李文超  
【摘要】:巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)是诱发鸡球虫病的3种常见球虫之一,具有很强的免疫原性,对其它几种鸡球虫有部分的交叉免疫力,故在各种研制的鸡球虫病疫苗中,巨型艾美耳球虫是必不可少的虫种之一。但是,巨型艾美耳球虫的株免疫原性差异最显著,在田间有时可因巨型艾美耳球虫免疫变异株的出现导致疫苗免疫失败。因此,疫苗的研制和使用有赖于对各地虫株的分离和深入研究,特别是虫株的抗原谱的分析及其分子基础的研究。 为此,本文采用单卵囊分离技术,获得了11株纯种球虫,根据其卵囊和孢子囊的大小、形状指数、寄生部位、致病性、最早孢子发育时间、最短的潜在期及LDH、GPI和G6PD同工酶酶谱等指标,鉴定这11株纯种球虫均为巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima Tyzzer,1929)。11株E.maxima每鸡免疫感染100个卵囊后,不仅对攻毒10×10~4个同源株卵囊时的致病力和增重损失明显降低,而且使每鸡攻毒1×10~4个同源株卵囊时的卵囊产量显著减少,显示各虫株均有很高的免疫原性。各虫株对异源株的交叉免疫力程度不一致,美国株对国内10个虫株的交叉保护力为20.09%~82.44%,仅对3株大于75%,对上海株的保护力最低;而国内10个虫株对美国株的交叉保护力为27.43%~95.26%,有5株大于75%,同样上海株对美国株的保护力最低;在国内6个虫株间的交叉保护力也不尽一致,其中上海株和其他各株的免疫原性差异最大,与扬州株间无交叉保护力。 免疫原性差异显著的E.maxima扬州株、上海株和美国株的孢子化卵囊和未孢子化卵囊可溶性蛋白的十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹图谱均没有差异,孢子化卵囊蛋白至少有18条电泳条带,其中有7条相对明显的主带,分


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