铅、镉联合对SD大鼠肾细胞的毒性损伤及硒的保护作用

【摘要】： 铅(Pb)、镉(Cd)均为重要的环境污染物,并通过食物链系统进入动物和人体产生毒性作用。本研究是在建立SD大鼠肾细胞培养的基础上,通过培养液中加入不同浓度的Cd(10、20、40μmol/L)、Pb(10,20,40μmol/L)和Pb-Cd联合(分别为5、10、20μmol/L),并加入Na_2SeO_30.5mg/L,在培养6h后,观察细胞形态、测定细胞凋亡率和细胞周期及上清液脂质过氧化指标,探讨Pb、Cd对肾细胞的联合毒性及硒的保护作用。结果表明: (1)建立了0.05%胰蛋白酶消化SD乳鼠肾组织培养肾细胞的方法,该法细胞产量高,操作简便,不易污染,花费较少。 (2)低浓度Pb或Cd(10μmol/L)对细胞无明显损伤,20μmol/L以上可以使细胞皱缩、体积变小,表面有细胞碎片,甚至呈泡沫状或树枝状。Pb、Cd联合可加剧细胞损伤。 (3)低浓度的Pb、Cd(10μmol/L)使细胞凋亡率下降,而20μmol/L以上的Pb、Cd均可使细胞凋亡率增加,并改变细胞周期。Pb、Cd联合具有明显的协同性,分别浓度达40μmol/L时,细胞凋亡率降低,表明细胞已有死亡。 (4)Pb、Cd均可引起肾细胞培养液GSH-Px、SOD的活性降低,MDA含量升高,并存在剂量和时间效应。 (5)在培养液中添加Na_2SeO_3,可降低肾细胞凋亡率,使细胞周期趋于正常,并缓解GSH-Px、SOD活性下降和MDA含量升高的幅度,表明Se对Pb、Cd所致的肾细胞损伤具有一定的保护作用。