MC4R、POU1F1基因多态性及其与京海黄鸡生长、屠宰性状关系的研究

【摘要】： 促黑激素皮质受体4(Melanocortin-4 receptor,MC4R)是动物下丘脑腹内侧核分泌的一类肽类物质,参与抑制体重的增加。垂体特异性转录因子(pituitary specifictranscription factor 1,POU1F1)参与调节机体的细胞生长与发育,促使生长激素(GH)、催乳素(PRL)和促甲状腺释放激素Beta因子(TSH-β)等基因的表达。鉴于MC4R基因和POU1F1基因对动物生长发育过程中的重要作用,本研究以优质肉鸡品种京海黄鸡为试验材料,采用PCR-SSCP研究了MC4R和POU1F1基因的单核苷酸多态性,并与该品种的生长及屠宰性状进行联合分析,为京海黄鸡分子标记辅助选择提供有效的遗传标记。同时,采用半定量RT-PCR技术分析比较了MC4R和POU1F1及相关基因在京海黄鸡和尤溪麻鸡中表达水平及相关关系,并与屠宰性状进行了相关分析。 研究结果如下: (1)MC4R基因引物P1在京海黄鸡中检测到AA、AB、BB三种基因型,A、B等位基因频率分别为0.929和0.071;引物P2检测到CC、CD、DD三种基因型,C、D等位基因频率分别为0.72和0.28。卡方检验表明在这两个基因位点上,基因频率和基因型频率都未达到Hardy-Weinberg平衡状态。测序结果表明,引物P1在第662bp处发生了G→C的突变,引物P2多态位点是由于DNA的733-734bp之间插入一个C碱基引起的。这两个多态位点均为在鸡MC4R基因研究中首次被检测到。 (2)POU1F1基因引物P1在京海黄鸡中检测到AA、AB、BB三种基因型,A、B等位基因频率分别为0.925和0.075;引物P6检测到AA、AB、BB三种基因型,A、B等位基因频率分别为0.5和0.5;引物P11检测到AA、AB、BB三种基因型,A、B等位基因频率分别为0.396和0.604。卡方检验表明,引物P1检测到的基因位点上,等位基因频率和基因型频率未达到Hardy-Weinberg平衡状态,而引物P6、P11的基因位点均达到Hardy-Weinberg平衡状态。测序结果发现,引物P1在第1876bp处发生了G→A突变,1882bp处发生C→T突变;引物P6在3684bp处发生了A→T的突变;引物P11在4573bp处发生了T→C的突变。 (3)MC4R基因P1引物AB基因型个体、P2引物DD基因型个体的体重、体尺及屠宰性能均略高于其他基因型,组合基因型AA/DD的体重、体尺要好于其他组合。POU1F1基因P1引物AA基因型个体、P6引物AA型个体、P11引物AB型个体的的体重、体尺及屠宰性能均略高于其他基因型,P1、P6组合AA/AB,P1、P11组合AA/AB,P、P11组合AB/AB效应最佳。因此,MC4R及POU1F1基因的SNPs多态位点对京海黄鸡的生长及屠宰性状的影响均比较重要,可以尝试将其作为相关性状的分子标记用于鸡的分子标记辅助选择。 (4)不同基因型内个体体尺性状、屠宰性能间相关关系分析表明,优势基因型个体的体斜长、胸骨长、胸宽、胫长、胴体重、半净膛重、全净膛重、胸肌重、腿肌重等指标间绝大部分存在着显著或极显著的相关关系,但与肌胃重之间一般没有显著的相关关系。 (5)京海黄鸡POU1F1、GH、PRL基因的表达量显著地高于尤溪麻鸡,京海黄鸡公鸡MC4R基因的表达量显著高于尤溪麻鸡公鸡,母鸡及总体间差异不显著。京海黄鸡与尤溪麻鸡群体内,POU1F1与GH、PRL基因的表达水平间存在着极显著的正相关关系。 (6)京海黄鸡群体内,MC4R基因表达量与肝重极显著相关;尤溪麻鸡群体内,MC4R基因表达量与肝重、心重极显著相关。