收藏本站
收藏 | 论文排版

酶联免疫间接法检测新型冠状病毒S蛋白抗体方法的建立及评价

曾小平  
【摘要】:目的:以新型冠状病毒S蛋白为包被抗原,建立检测新型冠状病毒抗体的ELISA间接法,评价本实验建立起来的ELISA间接法对检测SARS-CoV-2抗体的诊断价值及评估该法的可行性,用以检测接受过新冠肺炎疫苗或曾感染过新型冠状病毒人群中产生的抗体。方法:棋盘滴定法确定SARS-CoV-2 S蛋白最佳抗原浓度及样本血清最适稀释比例,用阳性血清对实验的最佳封闭液条件、最佳酶标二抗作用比例及时间、最佳样品及显色液的作用时间进行确立。用50名健康体检者血清得出的光密度值计算临界值。并对可能干扰本实验结果因素的不同肺部疾病、不同标本性状和不同内源性物质的血清进行检测,从而评价本实验建立起的ELISA间接法在检测新冠抗体的诊断价值。通过选取85名完成新冠灭活疫苗第二针接种健康体检者,用化学发光法明确61名有新冠抗体的血清为疫苗实验组,100名新冠核酸阴性、肺部影像学无异常的住院患者为阴性对照组,以S蛋白作为诊断抗原,用ELISA间接法检测后计算其敏感性、特异性和阳性预测值、阴性预测值及诊断效率,并计算注射新型冠状病毒疫苗后的阳性率。结果:棋盘滴定法确定S蛋白最适包被浓度为6.4μg/ml,血清最适稀释比例为1:100,最佳封闭条件为5%的牛血清白蛋白封闭1h,酶标二抗最佳稀释度和时间为1:1000时和1h,最佳样品和显色液的作用时间分别为45min和30min,Cut off值为0.224。在对干扰性因素进行检测时,不同标本性状的标本中,溶血的标本假阳性率为40%(8/20)。不同类别的肺部疾病中,社区获得性肺炎的标本假阳性率为8.3%(2/24)。其他干扰因素的标本假阳性率为0%,通过四格表资料χ~2检验得出溶血的标本会干扰实验结果的判读,其他干扰因素无统计学意义。S蛋白作为包被抗原建立起的ELISA间接法诊断的灵敏度为85.2%(52/61),特异性为89.0%(89/100),阳性预测值和阴性预测值分别为82.5%和90.8%,诊断效率为87.6%,检测85例注射新型冠状病毒疫苗健康体检者的抗体阳性率为75.3%(64/85)。结论:利用S蛋白作为包被抗原,通过本实验建立起的ELISA间接法的灵敏度为85.2%,特异性为89.0%,可用于协助诊断新冠肺炎或既往感染过患者体内抗体检测及评价新冠疫苗免疫后的免疫效果。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前17条
1 杨秀芳;董维鹏;陈璐;尹湘毅;方红梅;;重组新型冠状病毒疫苗军队应急接种任务的组织与实施[J];解放军医院管理杂志;2021年12期
2 焦键;马志翔;刘俊杰;;社区在新型冠状病毒疫情防控过程中的问题与对策研究[J];经济研究导刊;2020年33期
3 高勇;周赤忠;陈大兴;胡蝶;罗宽;;2019冠状病毒病的临床相关研究[J];中国感染与化疗杂志;2021年01期
4 殷婷婷;韩秋英;郑洋;王宝春;;新型冠状病毒疫情期间护士睡眠质量与正念水平的影响因素研究[J];护理管理杂志;2021年01期
5 郭永豪;张延炀;郭万申;;新型冠状病毒谱系分类及基因组核酸变异[J];河南预防医学杂志;2021年03期
6 周婧;杨鸣;张铮;曹丰;;新型冠状病毒导致多器官功能衰竭的机制探讨[J];中华老年多器官疾病杂志;2020年03期
7 黄鹏飞;;新型冠状病毒的核酸检测及安全防护[J];化工管理;2020年19期
8 刘益星;姬孟丹;;新型冠状病毒疫情防控形势下果蔬农产品产销对接的机制研究[J];河北农业科学;2020年05期
9 付鑫;;新型冠状病毒期间高校图书馆微信公众平台服务内容探析[J];数码世界;2020年09期
10 霍飞;;新型冠状病毒的流行现状与研究进展[J];职业与健康;2014年07期
11 陈执中;;新型冠状病毒及其防治药物研究进展[J];食品与药品;2014年02期
12 林惠然;;新型冠状病毒疫情对实验动物安全管理的挑战与思考[J];广东畜牧兽医科技;2021年01期
13 刘荷露;谢薇;顾新;;新型冠状病毒疫情期间口罩政府限价研究[J];决策咨询;2020年01期
14 沙广娟;;1例儿童感染新型冠状病毒合并流感病毒的报告[J];河南预防医学杂志;2020年05期
15 王族;宋海庆;;新型冠状病毒与脑血管病的关系[J];中国脑血管病杂志;2020年03期
16 缪晓辉;;预防新型冠状病毒的个人防护[J];微生物与感染;2020年01期
17 廖芳芳;蔡朝阳;胡明霞;李守萍;张爽;段滢;;新型冠状病毒无症状感染孕妇1例的院感防控实践[J];安徽卫生职业技术学院学报;2020年03期
中国重要会议论文全文数据库 前20条
1 苏明俊;孙东波;;猪δ-冠状病毒重组N蛋白抗体间接ELISA检测方法建立[A];中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会论文集[C];2016年
2 王勇;蒋广志;岳晓琳;刘尚高;;中东呼吸综合征冠状病毒研究进展[A];中国畜牧兽医学会2014年学术年会论文集[C];2014年
3 王瑞琳;金宁一;梁代清;;SARS冠状病毒分子生物学研究进展[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会论文集[C];2005年
4 季星来;柳树群;李妍;李岭;孙之荣;;SARS冠状病毒亚细胞定位的预测及其基因组多样性分析[A];中国的遗传学研究——中国遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2003年
5 宋晓国;张贺秋;王国华;陈坤;于继云;邱艳;朱翠侠;凌世淦;;SARS冠状病毒N-蛋白基因的克隆、表达及活性测定[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年
6 李策生;张爱华;林连珍;李星;刘俊生;杨晓明;;有机溶剂/表面活性剂灭活血浆中的SARS冠状病毒的研究[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年
7 潘辉榕;戴五星;吴少庭;;SARS冠状病毒E蛋白的表达与纯化[A];湖北省暨武汉生物化学与分子生物学学会第八届会员代表大会和第十五次学术年会论文摘要汇编[C];2004年
8 林梁;汪浩;张旭敏;王敬强;徐宁志;刘斯奇;;SARS冠状病毒N蛋白的化学修饰研究[A];中国蛋白质组学第二届学术大会论文摘要论文集[C];2004年
9 王红霞;孟庆文;刘永刚;施建忠;孔宪刚;冉多良;吴东来;;SARS冠状病毒未知蛋白5的原核表达[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集[C];2005年
10 秦莉;吴少庭;王西明;袁仕善;雷明军;潘辉榕;黄达娜;高世同;张仁利;屈伸;;SARS冠状病毒S蛋白部分序列2的克隆与表达[A];中华医学会热带病与寄生虫学分会机会性感染学术研讨会论文汇编[C];2007年
11 李艳;袁军法;石正丽;;蝙蝠中冠状病毒的分子流行病学研究[A];湖北省暨武汉市生物化学与分子生物学学会第八届第十七次学术年会论文汇编[C];2007年
12 黄太煌;;剖析SARS冠状病毒核蓋蛋白的结构及包裹机制[A];第十五届全国波谱学学术会议论文摘要集[C];2008年
13 姚四新;王宪文;周晓丽;刘兴友;刘金华;;鸭源性冠状病毒RT-PCR检测方法的建立及应用[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2010年
14 应万涛;郝运伟;张养军;彭文明;秦鄂德;蔡耘;魏开华;王杰;常国辉;孙薇;戴舒佳;李小海;朱云平;荔建奇;吴松峰;郭立海;代景泉;王京兰;万平;陈庭贵;杜春娟;李栋;万佳;蒯学章;李卫华;石蓉;魏汉东;曹诚;于蔓;刘红;董方霆;王东根;张学敏;钱小红;祝庆余;贺福初;;利用蛋白质组学研究技术分析SARS冠状病毒结构蛋白质[A];中国蛋白质组学首届学术大会论文摘要集[C];2003年
15 程淑琴;丁壮;;冠状病毒病的研究进展[A];人畜共患传染病防治研究新成果汇编[C];2004年
16 王欣宇;孙东波;;犬肠道冠状病毒基因型和重组的研究进展[A];中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会论文集[C];2016年
17 秦莉;吴少庭;王西明;袁仕善;雷明军;潘辉榕;黄达娜;高世同;张仁利;屈伸;;SARS冠状病毒S蛋白部分序列2的克隆与表达[A];全国新出现传染病学术研讨会资料汇编[C];2004年
18 ;中国疾病预防控制中心初步完成特异性和敏感性的SARS相关冠状病毒检测技术和方法并上报卫生部[A];吉林省预防医学会学术年会论文集[C];2004年
19 冯金磊;王波;牛国君;郭宇;陈卫强;杨诚;饶子和;;具有SARS冠状病毒主蛋白酶抑制活性的秦艽有效成分研究[A];中国化学会第28届学术年会第3分会场摘要集[C];2012年
20 王宏艳;谢苗荣;;冠状病毒及SARS病毒概述[A];2003全国SARS防治学术交流会论文集[C];2003年
中国博士学位论文全文数据库 前20条
1 李振勇;新型冠状病毒实验室诊断方法学研究[D];郑州大学;2005年
2 任武泽;SARS和SARS样冠状病毒遗传进化及其受体研究[D];中国科学院研究生院(武汉病毒研究所);2007年
3 张原;SARS冠状病毒的分子进化研究[D];复旦大学;2007年
4 牛军伟;冠状病毒广谱抑制剂体内评价及抗病毒机制探究[D];中国疾病预防控制中心;2020年
5 刘怀然;SARS冠状病毒S糖蛋白基因片段的表达及初步应用[D];东北农业大学;2005年
6 杨仁全;SARS病人组织中SARS冠状病毒全基因组克隆、序列分析及病毒样颗粒装配[D];南京农业大学;2005年
7 石嵘;SARS冠状病毒检测寡核苷酸基因芯片的研制及应用[D];第一军医大学;2004年
8 黄灿平;蝙蝠宿主中新病毒发现及蝙蝠冠状病毒HKU9受体的探索[D];中国疾病预防控制中心;2017年
9 徐东平;SARS冠状病毒的临床检测和基因变异分析研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2006年
10 王斌;猪肠道冠状病毒细胞受体及毒力因子研究[D];浙江大学;2020年
11 丁珍;冠状病毒N蛋白抑制IFN-β产生的分子机制研究[D];华中农业大学;2017年
12 樊峥;SARS冠状病毒PUMC02株全基因组cDNA的分段克隆及N蛋白的功能研究[D];中国协和医科大学;2005年
13 申梁;基于人冠状病毒OC43重组病毒抗病毒高通量筛选平台的建立及初步应用[D];中国疾病预防控制中心;2017年
14 刘珠果;表达SARS冠状病毒受体hACE2的SARS易感小鼠模型的建立[D];中国人民解放军军事医学科学院;2008年
15 李梦霞;猪丁型冠状病毒nsp3多功能区域的结构解析与功能研究[D];华中农业大学;2021年
16 周世力;肠道病毒71型基因组研究和SARS冠状病毒结构蛋白的鉴定与分析[D];华中农业大学;2004年
17 王瑞琳;SARS冠状病毒分离鉴定、疫苗构建及免疫血清制备研究[D];吉林大学;2006年
18 车小燕;严重急性呼吸综合征(SARS)实验室诊断技术的基础与应用研究[D];第一军医大学;2005年
19 刘正学;SARS病毒特异性抗原抗体基因和N基因的研究[D];武汉大学;2005年
20 陶鹏;SARS冠状病毒N蛋白的细胞定位及其RNA干扰研究[D];重庆医科大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前20条
1 曾小平;酶联免疫间接法检测新型冠状病毒S蛋白抗体方法的建立及评价[D];海南医学院;2021年
2 刘慧娟;新型冠状病毒图像的插画艺术研究[D];湖北美术学院;2021年
3 顾炳泉;RT-PCR检测马冠状病毒方法的建立和初步应用[D];南京农业大学;2005年
4 许寅超;SARS冠状病毒N抗原蛋白表达及血清抗体检测方法研究[D];第一军医大学;2004年
5 金秀峰;新型冠状病毒传播与爆发的基因组特征研究[D];南开大学;2021年
6 朱云鹏;SARS冠状病毒主蛋白酶抑制剂的筛选及研究[D];天津科技大学;2016年
7 胡亚伟;中东呼吸综合征冠状病毒受体结合的分子机制研究[D];安徽大学;2014年
8 苏明俊;猪δ冠状病毒重组N蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立与评价[D];黑龙江八一农垦大学;2017年
9 韩郁茹;猪急性腹泻综合征冠状病毒N蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定[D];中国农业科学院;2021年
10 王树青;基于生物信息学的SARS冠状病毒主蛋白酶抑制剂的设计[D];天津师范大学;2005年
11 乔佩雯;猫主要组织相容性复合体Ⅰ类分子呈递冠状病毒多肽的特征研究[D];中国疾病预防控制中心;2021年
12 张新月;猪δ冠状病毒西安野毒株的分离鉴定及其M蛋白的免疫原性研究[D];西北农林科技大学;2020年
13 王凯;冠状病毒木瓜样蛋白酶诱导自噬生物学效应研究[D];安徽医科大学;2013年
14 胡日查;SARS冠状病毒木瓜样蛋白酶生物学功能研究[D];内蒙古农业大学;2010年
15 张强;SARS冠状病毒核蛋白的原核表达及初步应用的研究[D];山西医科大学;2004年
16 张栩赫;新型冠状病毒疫情对抗VEGF治疗的影响[D];中国医科大学;2021年
17 叶旭;δ冠状病毒跨物种传播及猪δ冠状病毒遗传进化分析[D];华中农业大学;2019年
18 孙琰;严重急性呼吸综合征冠状病毒S蛋白与眼部受体—血管紧张素转化酶2作用机制的研究[D];第二军医大学;2005年
19 邢国荣;人口迁移对新型冠状病毒传播动力学的影响[D];山西大学;2021年
20 李少柏;东北部分地区猫冠状病毒病原学调查[D];吉林农业大学;2021年
中国重要报纸全文数据库 前20条
1 赵熙熙;蝙蝠或为致命冠状病毒宿主[N];中国科学报;2013年
2 本报见习记者 张冬冬;揭开新冠状病毒的面纱[N];中国科学报;2013年
3 本报记者 唐凤;新型冠状病毒来袭?[N];中国科学报;2012年
4 记者 王秉阳 屈婷;新型冠状病毒已确认存在人传人和医务人员感染[N];新华每日电讯;2020年
5 记者 屈婷 王秉阳;应对新型冠状病毒,该怎么预防[N];新华每日电讯;2020年
6 记者 黄筱 王秉阳;新型冠状病毒潜伏期无任何典型症状时或已具备传染性[N];新华每日电讯;2020年
7 记者 彭茜;冠状病毒知多少[N];新华每日电讯;2020年
8 记者 白瑜 黎昌政 廖君;请注意!新型冠状病毒存粪口传播风险[N];新华每日电讯;2020年
9 记者 张潇 实习生 刘榛 张娟;“抗击新型冠状病毒,我有信心”[N];西安日报;2020年
10 记者 张家伟;东南亚蝙蝠体内发现冠状病毒[N];健康报;2021年
11 实习记者 张佳欣;新研究发现冠状病毒致命弱点[N];科技日报;2021年
12 记者 刘霞;冠状病毒疫情二万多年前就已暴发[N];科技日报;2021年
13 本报记者 张梦旭;美国科学家长期研究人工冠状病毒合成技术[N];人民日报;2021年
14 记者 刘霞;冠状病毒中损伤血管的蛋白首次确定[N];科技日报;2021年
15 记者 李学华;澳大利亚科学家培育出新型冠状病毒活菌株[N];经济日报;2020年
16 中青报·中青网记者 邱晨辉;我国发布2019新型冠状病毒资源库[N];中国青年报;2020年
17 本报记者 吴奕萱;美康生物与疫情赛跑 完成两款新型冠状病毒检测产品研制[N];证券日报;2020年
18 本报记者 袁于飞;国家卫健委高级别专家组:我们有信心控制新型冠状病毒疫情[N];光明日报;2020年
19 本报驻德国特约记者 青木 本报驻日本特约记者 孙秀萍 本报驻新加坡特约记者 辛斌 柳玉鹏;各国复杂应对中国疫情[N];环球时报;2020年
20 记者 谭湘竹;省卫健委发布《新型冠状病毒预防绘本》[N];黑龙江日报;2020年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978